Différence entre immunofluorescence directe et indirecte

Le différence clé entre l'immunofluorescence directe et indirecte est que le L'immunofluorescence directe utilise un seul anticorps qui fonctionne contre la cible d'intérêt tandis que l'immunofluorescence indirecte utilise deux anticorps pour étiqueter la cible d'intérêt.

L'immunofluorescence ou l'imagerie cellulaire est une technique utilisée pour étiqueter un antigène cible spécifique avec un fluorophore. Ici, le fluorophore est un composé chimique fluorescent qui peut réémettre de la lumière lors de l'excitation de la lumière. Lorsqu'un fluorophore se lie à l'antigène cible, il permet la détection de la molécule cible dans l'échantillon. Pour le décrire davantage, lorsqu'un antigène se lie à un anticorps spécifique, il peut être conjugué à des fluorophores. Par conséquent, il est facile de détecter la présence de l'antigène cible dans l'échantillon lors de l'observation sous le microscope à fluorescence.

En outre, il existe deux types d'immunofluorescence; immunofluorescence directe et indirecte. La différence entre l'immunofluorescence directe et indirecte réside principalement dans le nombre d'anticorps utilisés et la conjugaison du fluorophore. C'est-à-dire que dans l'immunofluorescence directe, le fluorophore se conjugue directement à l'anticorps primaire alors qu'il était dans l'immunofluorescence indirecte, le fluorophore conjugue avec l'anticorps secondaire.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que l'immunofluorescence directe
3. Qu'est-ce que l'immunofluorescence indirecte
4. Similitudes entre l'immunofluorescence directe et indirecte
5. Comparaison côte à côte - Immunofluorescence indirecte directe sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que l'immunofluorescence directe?

L'immunofluorescence utilise des anticorps pour détecter des antigènes cibles spécifiques. L'immunofluorescence directe est l'un des deux types d'immunofluorescence. Dans l'immunofluorescence directe, un seul anticorps (anticorps primaire) implique et le fluorophore se conjugue directement avec l'anticorps primaire. Lors de la liaison de l'anticorps avec l'antigène cible, le fluorophore émet une fluorescence qui peut être détectée par un microscope à fluorescence.

Figure 01: Immunofluorescence directe

Cependant, l'immunofluorescence directe est une méthode coûteuse car les principaux anticorps conjugués sont coûteux par rapport aux anticorps secondaires. Néanmoins, il n'implique pas une étape supplémentaire par conséquent, une technique plus courte. De plus, les liaisons non spécifiques sont réduites dans l'immunofluorescence directe. Par conséquent, les espèces croisées croisées sont faibles. Mais en détection, la sensibilité de l'immunofluorescence directe est faible par rapport à l'immunofluorescence indirecte .

Qu'est-ce que l'immunofluorescence indirecte?

L'immunofluorescence indirecte est le deuxième type d'immunofluorescence qui implique deux types d'anticorps tels que les anticorps primaires et secondaires dans le marquage de l'antigène cible. Dans cette méthode, le fluorophore se conjugue avec l'anticorps secondaire. Par conséquent, cette technique implique une étape supplémentaire.

Figure 02: Immunofluorescence

Cependant, la sensibilité est élevée dans cette méthode car plusieurs fluorophores peuvent être conjugués aux anticorps secondaires et cela facilite la détection. De plus, l'immunofluorescence indirecte est moins coûteuse en raison du fait que la conjugaison des anticorps secondaires est moins coûteuse et plus facile. Par rapport à l'immunofluorescence directe, la réactivité croisée des espèces est élevée dans la méthode indirecte.

Quelles sont les similitudes entre l'immunofluorescence directe et indirecte?

• Ce sont deux types de technique d'immunofluorescence.
• Les anticorps primaires et le fluorophore impliquent les deux méthodes.
• De plus, la réaction antigène-anticorps se produit dans les deux méthodes.
• De plus, l'immunofluorescence directe et indirecte utilise un microscope à fluorescence pour la détection de l'antigène.

Quelle est la différence entre l'immunofluorescence directe et indirecte?

L'immunofluorescence peut être directe ou indirecte en fonction de la conjugaison du fluorophore avec les anticorps utilisés. Dans l'immunofluorescence directe, le fluorophore se conjugue avec l'anticorps primaire, qui est l'anticorps unique qui implique dans cette technique. Contrairement à cela, dans l'immunofluorescence indirecte, le fluorophore se conjugue avec l'anticorps secondaire, qui est l'un des deux types d'anticorps qui impliquent la technique. Par conséquent, la principale différence entre l'immunofluorescence directe et indirecte est le type d'anticorps qui se conjugue avec le fluorophore.

L'infographie suivante fournit une comparaison côte à côte de la différence entre l'immunofluorescence directe et indirecte.

Résumé - Direct vs Immunofluorescence indirecte

L'immunofluorescence est une technique utilisée pour détecter la présence d'antigènes spécifiques dans un échantillon. Cette technique utilise des anticorps spécifiques. Par conséquent, en cela, les anticorps se conjugent avec des fluorophores pour les détecter à l'aide d'un microscope fluorescent. De plus, il existe deux types d'immunofluorescence à savoir l'immunofluorescence directe et indirecte. L'immunofluorescence directe implique un seul anticorps et fluorophore directement conjugué à cet anticorps. L'immunofluorescence indirecte implique deux anticorps; primaire et secondaire et fluorophore conjugué à l'anticorps secondaire. Étant donné que plusieurs anticorps secondaires peuvent se lier à un anticorps primaire et que plusieurs fluorophores peuvent conjuguer avec des anticorps secondaires, l'immunofluorescence indirecte est une méthode plus sensible que la méthode directe. De plus, la méthode indirecte est moins coûteuse que la méthode directe. Ainsi, c'est la différence entre l'immunofluorescence directe et indirecte.

Référence:

1.«Immunofluorescence.»Wikipedia, Wikimedia Foundation, 19 août. 2018. Disponible ici 

Image gracieuseté:

1.«Hsp If iga» par Emmanuelm à EN.Wikipedia, (CC par 3.0) via Commons Wikimedia
2.«Immunofluorescence» par Westhayl618 - Propre travaux, (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia