La transfection est un processus impliqué dans le transfert de gènes des cellules eucaryotes à l'aide de méthodes chimiques ou physiques. La transfection peut être classée en deux principaux types nommés transfection transitoire et transfection stable. Pendant la transfection transitoire, le gène d'intérêt ne parvient pas à s'intégrer au génome de l'hôte et est exprimé temporellement au sein de l'hôte à court terme tandis que, dans une transfection stable, le gène d'intérêt s'intègre au génome de l'hôte et est maintenu à long terme en plusieurs générationss. C'est la principale différence entre la transfection transitoire et stable. Dans les deux cas, la transfection est réussie et les gènes sont exprimés.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la transfection transitoire
3. Qu'est-ce que la transfection stable
4. Comparaison côte à côte - transfection transitoire vs stable
5. Résumé
La transfection est un outil important pour insérer des gènes dans les cellules eucaryotes. Parmi les deux types de transfection, la transfection transitoire est un moyen courant dans le transfert de gènes. Grâce à un vecteur, les gènes étrangers sont transformés à l'intérieur des cellules hôtes. Une fois que l'ADN étranger entre dans la cellule hôte, il a deux options. Il peut soit s'intégrer au génome de l'hôte et se reproduire, soit rester à l'intérieur sans s'intégrer dans le génome. La transfection transitoire présente l'expression temporaire des gènes insérés sans s'intégrer dans le génome de l'hôte. Les gènes expriment et produisent la protéine codée jusqu'à ce que la cellule divise. Cependant, en raison de l'incapacité de l'intégration, il ne peut pas reproduire et entrer dans les générations futures. Ce type de transfection réussit pendant une courte période. Pendant la division cellulaire ou en raison de certains autres facteurs, l'ADN étranger est soumis à une dégradation. La transfection transitoire est indiquée lorsque l'ADN étranger est sous la forme d'ADN hautement enroulé.
Figure 01: transfection transitoire
La transfection stable montre une intégration des gènes étrangers réussie dans le génome de l'hôte. Une fois que l'ADN étranger entre dans la cellule hôte, une partie de l'ADN étranger s'intègre au génome de l'hôte et en fait partie. Par conséquent, l'ADN étranger reproduit et passe également dans les générations futures lorsque le génome de l'hôte se réplique. Ce type de transfection est complexe et rare. Cependant, en raison de la transfection stable dans le génome, ce trait est maintenu pendant une période plus longue de plusieurs générations.
La transfection stable est un processus difficile et nécessite une livraison efficace de l'ADN et de l'acquisition de cellules de l'ADN étranger dans son génome. Par conséquent, l'ADN linéaire favorise la transfection stable que l'ADN circulaire. Cependant, le taux de transfection stable est d'environ un sur 104 cellules transformées. Une transfection stable peut être observée par la cotransfomation d'un marqueur sélectionnable et effectuant la sélection artificielle sur un milieu.
Figure 02: Transfection stable
Transfection transitoire vs stable | |
L'ADN étranger ne s'intègre pas dans un génome hôte. | L'ADN étranger s'intègre au génome de l'hôte et en fait partie. |
Réplication au sein de l'hôte | |
Les gènes transfectés de manière transitoire ne se reproduisent pas au sein de l'hôte. Par conséquent, les gènes ne sont pas transmis aux générations suivantes. | Les gènes sont reproduits au sein de l'hôte et transmis aux générations futures. |
Durée de l'expression du gène | |
Les gènes sont exprimés pour une période de temps finie et après cela, elles sont détruites. | Les gènes font partie du génome et exprimé dans la génération pendant une longue période. |
Utiliser | |
Ceci est utile pour étudier les effets de l'expression à court terme des gènes ou des produits géniques. | Ceci est utile pour étudier les effets des expressions génétiques à long terme. |
Détection de la transfection | |
Les gènes sont exprimés et peuvent être facilement détectés en insérant un gène rapporteur. | La transfection stable peut être facilement détectée en insérant un marqueur sélectionnable et en sélectionnant à travers une sélection artificielle sur les médias. |
Occurrence et processus | |
La transfection transitoire est courante et non complexe pour effectuer. | La transfection stable est rare et complexe pour effectuer. |
Nature de l'ADN | |
L'ADN hautement suceux convient à la transfection transitoire. | L'ADN linéaire convient à une transfection stable. |
Applications | |
Ceci est utilisé pour des études sur le knockdown ou le silençage des gènes avec des ARN inhibiteurs, la production de protéines à petite échelle | Ceci est utilisé pour la production de protéines sur une pharmacologie à grande échelle à plus long terme, la thérapie génique, la recherche sur les mécanismes de la régulation génétique à long terme |
Les transfections transitoires et stables sont deux types de transfections indiquées lors du transfert du gène dans les cellules eucaryotes par des systèmes non à base. L'ADN étranger transformé n'est pas intégré au génome de l'hôte dans la transfection transitoire pendant qu'il s'intègre au génome de l'hôte dans une transfection stable. L'ADN enroulé circulaire est représenté une transfection transitoire tandis que l'ADN linéaire préfère la transfection stable. C'est la différence entre la transfection transitoire et stable. Cependant, la transfection transitoire est plus courante et facile par rapport à la transfection stable. Mais la sélection d'un parmi les deux dépend du but du transfert de gènes et de la durée du projet de recherche.
Les références:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay et Thomas A. Kost. «Expression des gènes transitoires et stables dans les cellules de mammifères transduites avec un vecteur de baculovirus recombinant.«Actes de l'Académie nationale des sciences des États-Unis d'Amérique. The National Academy of Sciences, 05 janvier. 1999. la toile. 25 mars. 2017
2. Kim, Tae Kyung et James H. Eberwine. «Transfection des cellules mammifères: le présent et l'avenir.»Chimie analytique et bioanalytique. Springer-Verlag, août. 2010. la toile. 25 mars. 2017