Différence entre marqueur sélectionnable et gène rapporteur

Différence entre marqueur sélectionnable et gène rapporteur

Différence clé - Marker sélectionnable vs Gene Reporter
 

La technique de génie génétique est utilisée pour transférer des gènes importants de l'organisme à un autre organisme. L'insertion d'un gène étranger dans le génome d'un autre organisme et l'exprimer dans la cellule hôte sont les étapes les plus difficiles du transfert de gènes. Pour détecter le succès du processus de transformation, un marqueur sélectionnable et un gène rapporteur sont utilisés dans la molécule recombinante. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN ou un gène qui exprime et sélectionne les cellules transformées des cellules non transformées. Un gène rapporteur est un autre gène qui est utilisé pour distinguer les cellules transformées et pour quantifier ou détecter comment le gène inséré fonctionne dans l'hôte. La principale différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur est que le Un marqueur sélectionnable est utilisé pour filtrer les cellules non transformées et signaler les cellules transformées tandis que le gène rapporteur est utilisé pour quantifier le niveau d'expression des gènes au sein de l'hôte.

CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que le marqueur sélectionnable
3. Qu'est-ce que le Gene Reporter
4. Comparaison côte à côte - marqueur sélectionnable vs gène rapporteur
5. Résumé

Qu'est-ce qu'un marqueur sélectionnable?

En génie génétique, le gène d'intérêt est inséré dans un vecteur approprié et transformé en organismes hôtes. Cependant, la transformation ne réussit que dans les cellules hôtes compétentes, et il y a une possibilité de cellules hôtes pour rejeter l'absorption d'ADN étranger. Par conséquent, la différenciation des cellules transformées et non transformées est importante pour poursuivre une expérimentation supplémentaire. Par conséquent, les chercheurs intègrent un gène marqueur sélectionnable au vecteur pour une sélection facile des cellules transformées à partir de cellules non transformées. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN, en particulier un gène utile dans l'identification des cellules transformées. Ce gène marqueur présente un trait qui convient à une sélection artificielle de cellules transformées à partir de cellules non transformées sur un milieu.

Les marqueurs sélectionnables les plus courants utilisés en biologie moléculaire sont les gènes résistants aux antibiotiques. Un gène de résistance aux antibiotiques est inséré dans le vecteur et transformé en cellules hôtes en particulier en bactérie hôte. Cet antibiotique particulier est incorporé dans le milieu en croissance de la bactérie.  En raison de la présence du marqueur sélectif, dans les conditions sélectives, seules les cellules qui contiennent le marqueur sélectionnable approprié peuvent survivre. Les cellules non transformées ne peuvent pas se développer dans le milieu contenant des antibiotiques. Par conséquent, en raison du marqueur sélectionnable qui est résistant aux antibiotiques, les cellules transformées sont facilement identifiées.

Gènes qui confèrent des traits aux antimétabolites, les herbicides sont utilisés comme marqueurs sélectifs dans les vecteurs de clonage en génie génétique des plantes. Cependant, cette cotransformation de marqueurs sélectifs en organismes génétiquement modifiés a des effets négatifs sur l'environnement et l'homme. La libération de bactéries résistantes aux antibiotiques peut augmenter la résistivité antibiotique des agents pathogènes humains. Il peut contaminer le produit ou la biomasse par des antibiotiques et peut perdre la pression sélective en raison de la dégradation et de l'inactivation des antibiotiques.

Figure 01: vecteur plasmidique pour le transfert de gènes avec un marqueur sélectionnable

Qu'est-ce qu'un gène journaliste?

Les gènes reporter sont des gènes qui permettent la détection ou la mesure de l'expression du gène inséré. Ces gènes reporter peuvent être attachés à des séquences de régulation du gène d'intérêt pour signaler l'emplacement ou les niveaux d'expression. Par conséquent, pendant l'expression de gènes sous le même promoteur, ils sont transcrits en une seule séquence d'ARNm, puis traduits en protéine qui peut indiquer le niveau d'expression génique.

Les gènes reporter sont de différents types, et ils contiennent des caractéristiques visuellement identifiables qui sont généralement impliquées dans les protéines fluorescentes et luminescentes. Les gènes qui codent les protéines et les enzymes fluorescentes, convertissent les substrats invisibles en produits luminescents ou colorés en signalant l'expression des gènes réussie et en donnant la possibilité de quantification de l'expression des gènes.

Figure 02: Expression du gène du reporter

Quelle est la différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur?

Marqueur sélectionnable vs Gene Reporter

Le marqueur sélectionnable est une sorte de séquence d'ADN qui aide à distinguer les cellules transformées avec des cellules non transformées. Le gène rapporteur est un gène qui aide à quantifier l'expression du gène souhaité inséré dans la cellule hôte.
Nature des unités produites
Les gènes sont codés avec des caractéristiques qui aident à la sélection artificielle sur les médias en croissance. Les gènes sont codés avec des caractéristiques visuellement identifiables.
Usage
Gènes de résistance aux antibiotiques, gènes antimétabolites, gènes de résistance aux herbicides, etc. sont des exemples pour un marqueur sélectionnable. Code des gènes pour la protéine fluorescente verte, la β-glucuronidase, le chloramphénicol acétyltransférase, la protéine fluorescente rouge, etc. sont des exemples.

Résumé - Marker sélectionnable vs Gene Reporter

Les marqueurs sélectionnables permettent aux cellules transformées de se développer dans des milieux sélectifs dosés avec des antibiotiques ou des herbicides particuliers. Ils sont utilisés pour la sélection précoce de cellules transformées. Les gènes reporter sont utilisés pour quantifier le niveau d'expression du gène souhaité inséré. Ils permettent également la différenciation des cellules transformées et non transformées. C'est la différence entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur. Le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur sont considérés comme des marqueurs importants en génie génétique.

Les références:
1. Ziemienowicz, Alicja. «Marqueurs sélectionnables de plante et gènes de journaliste.”SpringerLink. Springer-Verlag, n.d. la toile. 23 mars. 2017.
2. Shih, Chen-Han, Hsiao-yin Chen, Hung-Chieh Lee et Huai-Jen Tsai. «Le gène du chromoprotéine violette sert de nouveau marqueur de sélection pour la transgénèse de la microalga Nannochloropsis oculata.»Plos un. Bibliothèque publique des sciences, n.d. la toile. 25 mars. 2017

Image gracieuseté:
1. «Plasmide avec insert» de Michael Jeltsch - Propre travaux (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia
2. «Gene de reporter» par TransControl à EN.Wikipedia (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia