Le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses est une tendance populaire où de nouvelles techniques basées sur la protéomique et la génomique sont utilisées dans le but d'identifier les tumeurs ou les cellules infectieuses, sa prolifération et les sites de développement cellulaire et d'analyser la base génétique des maladies les plus transmissibles et non transmissibles. Cela se traduira par un traitement et une conception de médicaments précis et dans le développement de thérapies personnalisées pour les maladies. L'hybridation in situ (ISH) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux techniques aussi largement utilisées en biologie du cancer et la principale différence entre l'hybridation in situ et l'immunochimie réside dans les molécules utilisées dans la procédure d'analyse. Dans l'ISH, les sondes d'acide nucléique sont utilisées dans l'analyse tandis que dans IHC, les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour les déterminations diagnostiques.
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que l'hybridation in situ
3. Qu'est-ce que l'immunohistochimie
4. Similitudes entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie
5. Comparaison côte à côte - hybridation in situ vs immunohistochimie sous forme tabulaire
6. Résumé
L'hybridation in situ est une technique d'hybridation d'acide nucléique qui est directement réalisée sur une partie ou une section des tissus, dans tout le tissu ou dans les cellules. La technique dépend de la théorie de l'appariement de base complémentaire de Watson Crick, entraînant des hybrides d'ADN-ADN ou des hybrides d'ADN-ARN qui peuvent détecter les gènes mutés ou identifier le gène requis d'intérêt. Les séquences d'ADN simple brin, les séquences d'ADN double brin, les séquences d'ARN simple brin ou les séquences d'oligonucléotides synthétiques sont utilisées comme sondes pendant la technique d'hybridation, et ces sondes sont marquées avec un phosphore radioactif à son extrémité 5 'pour les procédures d'identification lors de l'autoradiographie ou marqué à l'aide de colorants fluorescents. Il existe différents types de techniques ISH disponibles en fonction du type de sonde utilisé et du type de technique de visualisation suivi.
Figure 01: Hybridation fluorescente in situ
Il existe de nombreuses applications de l'ISH, principalement dans les diagnostics moléculaires des maladies infectieuses afin d'identifier la présence d'agents pathogènes et de confirmer l'agent pathogène via des diagnostics moléculaires. Il est également utilisé dans les domaines de la biologie du développement, du caryotypage et de l'analyse phylogénétique et la cartographie physique des chromosomes.
Dans la technique de l'IHC, la molécule principale analysée est l'antigène. Pendant l'IHC, des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes lors de l'infection ou de l'état de prolifération des cellules malignes. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps et les étiquettes enzymatiques sont utilisées pour cette technique; L'une de ces applications est l'ELISA (test immuno-enzyme lié à l'enzyme). Les marqueurs peuvent également être des anticorps étiquetés fluorescents ou des anticorps marqués radio.
Figure 02: Immunohistochimie
IHC est largement utilisé pour la détection des cellules cancéreuses. Les procédures de diagnostic ciblent les antigènes présents sur les cellules tumorales pour identifier et caractériser la tumeur. La même procédure est incorporée pour diagnostiquer les agents infectieux. Des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont également utilisés pour analyser différents produits géniques en permettant la réaction de liaison anticorps-antigène entre la protéine souhaitée et l'anticorps synthétique administré.
Hybridation in situ vs immunohistochimie | |
ISH est une technique d'hybridation d'acide nucléique qui est directement effectuée sur une partie ou une section de tissu ou le tissu entier. | IHC est une technique où des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes, qui sont des marqueurs de protéines spéciaux placés sur les surfaces cellulaires. |
Type de molécules bio analysées | |
Ish analyse les acides nucléiques. | IHC analyse les protéines-antigènes. |
Base de la réaction biochimique | |
L'appariement de base complémentaire entre l'ADN-ADN ou l'ADN-ARN se produit dans cette technique. | Les interactions antigènes-anticorps sont impliquées dans l'immunohistochimie. |
Méthodes de détection liées à l'enzyme | |
Les méthodes de détection liées à l'enzyme ne peuvent pas être utilisées dans ISH. | Les méthodes de détection liées à l'enzyme peuvent être utilisées dans IHC. |
Les diagnostics moléculaires sont des méthodes rapides et de confirmation qui peuvent être utilisées pour identifier une maladie non transmissible telle que le cancer ou les maladies transmissibles telles que le VIH ou la tuberculose basées sur les marqueurs moléculaires présents sur les cellules qui conduisent à la manifestation de la maladie. Des marqueurs moléculaires peuvent être présents sous la forme de protéines exprimées ou au niveau génétique en fonction de laquelle différentes nouvelles techniques sont introduites pour augmenter l'efficacité et sont moins laborieuses, bien qu'il y ait un coût élevé impliqué dans ces techniques. Ainsi, l'ISH dépend de l'ADN-ADN ou de la formation hybride d'ADN-ARN, et l'IHC dépend des réactions spécifiques entre l'anticorps et l'antigène. C'est la différence entre l'hybridation in situ.
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1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. «Applications de l'immunohistochimie.»Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, août. 2012, disponible ici. Consulté le 24 août. 2017.
2. «Hybridation in situ (ISH).»Information du Centre national pour la biotechnologie, u.S. Bibliothèque nationale de médecine, disponible ici. Consulté le 24 août. 2017.
1. «Fish (Hybridation fluorescente in situ)» par Mrmatze - Propre travaux (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. «Immunohistochimicalstaining2» par Imoen à la langue anglaise Wikipedia (CC By-sa 3.0) via Commons Wikimedia