Différence entre ELISA directe et indirecte
Différence clé - Direct vs ELISA indirect
Un immunodosage lié à l'enzyme (ELISA), également connu sous le nom d'immunodosage enzymatique, est un test sérologique qui détecte les anticorps dans le sang. Il est utilisé comme outil de diagnostic pour savoir si le patient a été exposé à un type particulier de virus ou à un autre agent infectieux (antigène) et si le corps a produit des anticorps contre l'infection. ELISA peut également identifier les infections passées et actuelles. Par conséquent, ELISA est souvent utilisée comme test de présélection par les médecins avant l'analyse approfondie des maladies. Ce test peut être effectué en laboratoire en prélevant un échantillon de sang du patient. Il existe deux types de test ELISA: ELISA direct et ELISA indirect. La principale différence entre ELISA directe et indirecte est que L'ELISA indirecte est plus sensible et nécessite l'ajout d'un anticorps secondaire alors que Elisa direct est moins sensible et n'utilise qu'un anticorps primaire.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que Direct Elisa
3. Qu'est-ce que ELISA indirect
4. Comparaison côte à côte - Direct vs ELISA indirect
5. Résumé
Qu'est-ce que Direct Elisa?
ELISA est un test de diagnostic de maladie effectué pour identifier la présence d'antigènes ou d'anticorps particuliers dans le sang. Il se fait comme test de plaque. Il utilise des anticorps liés à des enzymes facilement dosées. La présence des antigènes dans l'échantillon sérique se lie à des anticorps spécifiques liés aux enzymes. Dans la dernière étape, un substrat spécifique est ajouté pour réagir avec l'enzyme. L'enzyme convertit le substrat en un produit coloré ou de signal. Le changement de couleur dans le substrat chimique révèle la présence d'un anticorps particulier dans l'échantillon sérique. Le test ELISA direct utilise uniquement un anticorps primaire lié à l'enzyme. Lors de la liaison à l'antigène, il change rapidement la couleur, indiquant la présence de l'agent infectieux dans le sang. Cependant, l'intensité des signaux est plus faible en ELISA directe car les épitopes sont limités à la liaison des antigènes. Par conséquent, l'ELISA direct est moins sensible par rapport à ELISA indirect.
Figure 01: Test d'ELISA direct
Qu'est-ce que ELISA indirect?
ELISA peut être effectué en utilisant deux types d'anticorps à savoir; anticorps primaire et anticorps secondaire. L'outil ELISA indirect utilise les deux types d'anticorps pour amplifier les signaux pour une meilleure détection. La technique ELISA indirecte est réalisée comme suit.
- Les plaques sont incubées avec des antigènes et lavées pour bloquer la liaison non spécifique.
- Ensuite, des anticorps primaires sont ajoutés et lavés.
- Un anticorps secondaire lié à l'enzyme est ajouté et lavé.
- Un substrat est ajouté et autorisé à réagir avec des enzymes.
- Des signaux sont détectés, et la présence ou l'absence de l'antigène spécifique dans l'échantillon est identifiée.
Dans le test ELISA indirect, plusieurs anticorps secondaires peuvent se lier à un seul anticorps primaire. Les anticorps secondaires sont liés à des enzymes facilement dosées. Par conséquent, une liaison peut faire un signal fort en raison de plus d'une interaction. Par conséquent, ELISA indirecte est plus sensible que ELISA direct. Cependant, l'ELISA indirecte peut faire des signaux non spécifiques dus aux réactions croisées des anticorps secondaires.
Figure 02: Test ELISA indirect
Quelle est la différence entre ELISA directe et indirecte?
Direct vs ELISA indirect | |
| L'ELISA directe est moins sensible par rapport à ELISA indirecte. | L'ELISA indirecte est plus sensible. |
| Temps pris | |
| Le test ELISA direct est un processus rapide. | ELISA indirecte prend du temps. |
| Utilisation des anticorps | |
| Un seul type d'anticorps (anticorps primaires) est utilisé dans ELISA direct. | Les anticorps primaires et secondaires sont utilisés pour ELISA indirecte. |
| Lien avec les enzymes | |
| Les anticorps primaires sont liés aux enzymes. | Les anticorps secondaires sont liés aux enzymes. |
| Réactivité croisée des seconds anticorps | |
| ELISA direct élimine la réactivité croisée des seconds anticorps. | L'ELISA indirecte est affectée par une réactivité croisée des seconds anticorps. |
| Signaux | |
| Les signaux sont faibles par rapport à ELISA indirecte. | Les signaux sont amplifiés dans ELISA indirecte. Par conséquent, il est facile de détecter. |
Résumé - Direct vs ELISA indirect
ELISA est une technique biochimique utilisée principalement en immunologie pour détecter la présence d'un anticorps ou d'un antigène dans un échantillon de sang d'un patient. Il peut être effectué via deux processus appelés ELISA directs ou indirects. Le test d'ELISA direct utilise uniquement des anticorps primaires pour détecter l'antigène tandis que ELISA indirecte utilise des anticorps primaires et secondaires. Dans ELISA direct, les anticorps primaires sont marqués tandis que dans les anticorps secondaires ELISA indirects. C'est la différence entre ELISA directe et indirecte.
Les références
1.»Le test immuno-enzymatique (ELISA) (ELISA).»Bulletin de l'Organisation mondiale de la santé. U.S. Bibliothèque nationale de médecine, 1976. la toile. 29 mars. 2017
2. Loon, un. M Van, J. T van der Logt, f. W. Heessen et J. Van der Veen. «Dosage immunosorbant lié à l'enzyme qui utilise l'antigène marqué pour la détection de l'immunoglobuline M et des anticorps dans la toxoplasmose: comparaison avec l'immunofluorescence indirecte et le test immunosorbant à double sandwich.»Journal of Clinical Microbiology. U.S. Bibliothèque nationale de médecine, juin 1983. la toile. 29 mars. 2017
Image gracieuseté:
1. «Diagramme Elisa» par Cavitri - Propre travaux (CC par 3.0) via Commons Wikimedia
2. «Indirect Elisa» par Cawang - Propre travaux (CC0) via Commons Wikimedia
