Différence entre BCA et Bradford Assay

Le Différence clé entre BCA et Bradford Assay Est-ce que le test BCA prend du temps et moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.

Le test BCA et Bradford est deux méthodes de test de détermination de la concentration des protéines. Ces deux tests ont des principes différents de test et des différences dans leurs précisions.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que le test BCA
3. Qu'est-ce que le test Bradford
4. BCA vs Bradford Assay sous forme tabulaire
5. Résumé - BCA vs Bradford Assay

Qu'est-ce que le test BCA?

Test BCA ou test d'acide bicinchoninique est un test biochimique utile pour déterminer la concentration totale de protéine dans une solution. Cette méthode est également nommée comme Assayage de Smith Après son inventeur, Paul K. Forgeron. Cette méthode analytique montre des similitudes avec le test de protéines Lowry, le test de protéine Bradford ou le réactif Biuret. Nous pouvons observer la concentration totale de protéines dans un échantillon donné grâce à un changement de couleur de la solution d'échantillon, qui passe du vert au violet. Ce changement de couleur se produit proportionnellement à la teneur en protéines. Par la suite, nous pouvons utiliser une technique colorimétrique pour analyser l'intensité des couleurs et la teneur en protéines dans l'échantillon.

Méthode d'estimation des protéines BCA

Lorsque vous envisagez le mécanisme du test BCA, la solution BCA typique contient une solution très alcaline avec un pH de près de 11.25, et les ingrédients de cette solution comprennent l'acide bicinchoninique, le carbonate de sodium, le bicarbonate de sodium, le tartrate de sodium et le pentahydrate de sulfate de cuivre (II). Ce test dépend principalement de deux réactions chimiques: la réduction du cuivre (II) au cuivre (i) par les liaisons peptidiques en protéine et la chélation de deux molécules d'acide bicinchoninique avec un ion cuivre (i), résultant en un complexe de couleur violet qui peut absorber la lumière à 562 nm de longueur d'onde. Dans la première réaction, la quantité de cuivre (II) réduite par les liaisons peptidiques est proportionnelle à la quantité de protéines dans l'échantillon.

Qu'est-ce que le test Bradford?

Le test Bradford est une méthode analytique spectroscopique utile pour mesurer la concentration de protéine dans une solution. Cette méthode a été développée par Marion M. Bradford en 1976, et c'est une méthode relativement rapide et précise.

Réaction couleur des protéines et réactif de Bradford

Nous pouvons utiliser cette méthode pour déterminer la concentration de la quantité de protéines dans un échantillon. La réaction chimique qui se déroule dans l'échantillon pendant ce test dépend uniquement de la composition des acides aminés de la protéine dans l'échantillon.

Méthode d'estimation des protéines de Bradford

Lorsque vous envisagez la méthode de ce test, il s'agit d'un test de protéine colorimétrique basé sur le décalage d'absorbance du colorant nommé Coomassie Brilliant Blue G-250. Généralement, ce colorant existe sous trois formes sous forme de forme anionique (bleue), de forme neutre (verte) et cationique (rouge). Par conséquent, dans des conditions acides, le colorant change sa couleur du rouge au bleu. Cela est dû à la liaison de la protéine avec le colorant. En revanche, s'il n'y a pas de protéine pour se lier avec le colorant, le changement de couleur n'apparaît pas, la solution obtient une couleur brun rouge. Ce colorant est capable de former un complexe fort et non covalent avec le groupe carboxyle de la protéine à travers les forces van der Waal et les attractions électrostatiques.

Quelle est la différence entre le test BCA et Bradford?

Le test BCA et Bradford est deux méthodes de test de détermination de la concentration des protéines. Ces deux tests ont des principes différents de test et des différences dans leurs précisions. La principale différence entre BCA et Bradford Assay est que le test BCA prend du temps et moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.

L'infographie suivante résume les différences entre le test BCA et Bradford sous forme tabulaire.

Résumé - BCA vs Bradford Assay

Le test BCA ou le test d'acide bicinchoninique est un test biochimique utile pour déterminer la concentration totale de protéines dans une solution. Le test Bradford est une méthode analytique spectroscopique utile pour mesurer la concentration de protéine dans une solution. La principale différence entre BCA et Bradford Assay est que BCA prend du temps et moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.

Référence:

1. «Bradford Protein Assay.»Biosciences expérimentales, Rice University.

Image gracieuseté:

1. «Bradford Protein Assay» par Helito - Propre travaux (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia
2. «BSA Standard Curve» par Alexieogo - Propre travaux (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia