Quelle est la différence entre le test colorimétrique et fluorométrique

Le différence clé entre le test colorimétrique et fluorométrique est ce test colorimétrique détermine la concentration de composés colorés dans une solution tandis que le test fluorométrique détermine le mécanisme cinétique d'une solution.

Un test biochimique est une technique qui détecte ou quantifie l'activité d'une molécule biologique ou d'une substance analytiquement. C'est un in vitro processus. Le test colorimétrique et le test fluorométrique sont deux types de tests biochimiques communs effectués dans les laboratoires. Plusieurs techniques telles que ELISA et Western blot sont également des tests biochimiques complexes pour la quantification de l'activité métabolique et la mesure du comportement fonctionnel des biomolécules telles que les protéines, les enzymes et d'autres petites molécules. Ces types de tests sont utilisés pour l'identification des interactions protéine-ADN, protéine-ARN et protéine-protéine.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce qu'un test colorimétrique
3. Qu'est-ce qu'un test fluorométrique
4. Similitudes - test colorimétrique et fluorométrique
5. Essais colorimétriques vs fluorométriques sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce qu'un test colorimétrique?

Un test colorimétrique est une technique qui détermine la concentration de composés colorés dans une solution. En d'autres termes, le test colorimétrique est une réaction qui conduit à un changement de couleur en raison d'une réaction enzymatique ou chimique entre les réactifs et les analytes. Des tests colorimétriques sont pratiqués en biochimie pour tester les enzymes, les composés spécifiques, les hormones, les anticorps et autres analytes. Ils utilisent des colorimètres ou des spectrophotomètres. Les colorimètres sont des instruments qui caractérisent les échantillons colorés afin de fournir une mesure objective des caractéristiques de couleur. Un spectrophotomètre est un dispositif qui mesure l'intensité de la lumière en fonction de la couleur ou de la longueur d'onde de la lumière.

Figure 01: test colorimétrique

Comment fonctionne un test colorimétrique?

Dans un test colorimétrique, une plaque est préparée avec un anticorps particulier lié aux puits. Ensuite, l'échantillon est ajouté. Cela peut permettre à l'échantillon de se lier à l'anticorps. Ensuite, un anticorps de détection et un substrat sont ajoutés aux puits pour réagir avec la sonde de détection. Une solution d'arrêt est ajoutée à la fin avant la lecture. Un puits vide appelé le blanc est laissé sans l'échantillon. Dans le test colorimétrique, plus la couleur est foncée, plus la concentration d'analyte est grande. Habituellement, une seule longueur d'onde est nécessaire pour prendre la lecture. Mais s'il y a une mesure de référence, deux ou plusieurs longueurs d'onde sont utilisées.

Qu'est-ce qu'un test fluorométrique?

Le test fluorométrique est une technique qui détermine le mécanisme cinétique des réactions enzymatiques. Un test fluorométrique a lieu avec une formation d'un produit fluorescent à partir d'un substrat non fluorescent ou vice versa. Ce test utilise également le transfert d'énergie de résonance de fluorescence (FRET) où, la réaction enzymatique modifie la position de deux fluorophores dans le substrat ainsi, modifiant l'intensité de fluorescence.

Figure 02: test fluorométrique

Les tests fluorométriques sont généralement beaucoup plus sensibles que les autres tests. Les estimations des enzymes diagnostiques dans les échantillons de tissus, de cellules ou de liquide de patients augmentent en raison de sa sensibilité plus élevée.

Comment fonctionne un test fluorométrique?

Dans un essai fluorométrique, un substrat est ajouté à l'échantillon dans la plaque, et la réponse de fluorescence est prise en utilisant le lecteur de plaque. Ici, chaque cellule est mesurée séparément. Des plaques opaques sont utilisées dans les tests fluorométriques. Cela réduit la diffusion de la lumière. Deux longueurs d'onde sont nécessaires pour ce type de test. Une longueur d'onde consiste à détecter l'excitation et l'autre longueur d'onde est pour l'émission.

Quelles sont les similitudes entre le test colorimétrique et fluorométrique?

• Le test colorimétrique et le test fluorométrique sont deux types de tests biochimiques.
• Les deux tests sont effectués pour les diagnostics médicaux.
• Ces tests impliquent une réaction enzymatique.
• Les deux tests impliquent un substrat et des analytes.

Quelle est la différence entre le test colorimétrique et fluorométrique?

Un test colorimétrique est une technique qui détermine la concentration de composés colorés dans une solution, tandis que le test fluorométrique est une technique qui détermine le mécanisme cinétique des réactions enzymatiques. C'est donc la principale différence entre le test colorimétrique et fluorométrique. De plus, les tests fluorométriques sont plus sensibles que les tests colorimétriques; Ainsi, les tests fluorométriques ont la capacité de détecter plus d'analytes. Ainsi, il s'agit d'une autre différence importante entre le test colorimétrique et fluorométrique. De plus, les tests fluorométriques nécessitent deux longueurs d'onde, tandis que les tests colorimétriques sont effectués avec une longueur d'onde.

L'infographie ci-dessous tabule plus de différences entre le test colorimétrique et fluorométrique.

Résumé - Colorimétrique vs test fluorométrique

Un test biochimique est un processus analytique utilisé pour déterminer et quantifier les réactions métaboliques cellulaires. Le test colorimétrique et le test fluorométrique sont deux types de tests biochimiques. Le test colorimétrique est une réaction qui entraîne un changement de couleur en raison d'une réaction enzymatique ou chimique entre les réactifs et les analytes tandis que le test fluorométrique est une technique qui est utilisée pour déterminer le mécanisme cinétique des réactions enzymatiques.  Les deux tests dépendent d'une réaction enzymatique qui implique un substrat et un analyte. Les tests fluorométriques sont plus sensibles que les tests colorimétriques. Plus important encore, les tests fluorométriques nécessitent deux longueurs d'onde, tandis que les tests colorimétriques peuvent être effectués avec une seule longueur d'onde. Ainsi, cela résume la différence entre le test colorimétrique et fluorométrique.

Référence:

1. «Des tests colorimétriques.»Biosciences expérimentales.
2. «Dosages enzymatiques fluorométriques.«Enzymes créatives.

Image gracieuseté:

1. «Colorimétrique» par Sepehr Ehsani (CC By-NC-ND 2.0) via Flickr
2. «Fluorimètre» par Matthias M. - Propre travail (CC par 3.0) via Commons Wikimedia