Différence entre immunofluorescence et immunohistochimie

Différence clé - Immunofluorescence vs immunohistochimie
 

Diagnostics de la maladie, qui utilise des méthodes biologiques moléculaires, est devenue un domaine émergent de la technologie de laboratoire clinique. Il comprend tous les tests et méthodes pour identifier une maladie et comprendre la cause d'une maladie en analysant l'ADN, l'ARN ou les protéines exprimées dans un organisme. Les progrès rapides des diagnostics moléculaires ont permis une recherche fondamentale sur les maladies transmissibles et non transmissibles. Ceux-ci sont utilisés pour déterminer les changements dans les niveaux de séquence ou d'expression dans des gènes ou des protéines cruciales impliquées dans la maladie. L'immunofluorescence (IF) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux techniques aussi largement utilisées en biologie du cancer. Si est un type d'IHC où une méthode de détection de fluorescence est utilisée pour analyser les anticorps monoclonaux et polyclonaux, tandis que l'IHC utilise des méthodes chimiques pour détecter les anticorps monoclonaux et polyclonaux. C'est la principale différence entre si et ihc.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que l'immunofluorescence 
3. Qu'est-ce que l'immunohistochimie
4. Similitudes entre immunofluorescence et immunohistochimie
5. Comparaison côte à côte - Immunofluorescence vs immunohistochimie sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que l'immunofluorescence (IF)?

L'immunofluorescence est une technique de détection où les anticorps utilisés dans le test sont marqués à l'aide de colorants fluorescents ou de protéines fluorescentes à des fins de détection. Les anticorps secondaires marqués peuvent entraîner des signaux de fond indésirables; Par conséquent, si la technique est basée sur l'étiquetage de l'anticorps primaire lui-même à l'heure actuelle afin d'éviter les signaux indésirables pendant la détection. Grâce à cette technique, une liaison non spécifique entre l'anticorps primaire et secondaire est empêchée, et elle est plus rapide car il n'y a pas d'étape d'incubation secondaire impliquée. La qualité des données est également améliorée.

Figure 01: Coloration à double immunofluorescence pour BrdU, NEUN et GFAP

Les fluorochromes ou les colorants fluorescents sont des composés qui peuvent absorber le rayonnement, de préférence un rayonnement ultra violet excité. Lorsque les particules atteignent l'état fondamental de l'état excité, ils émettent un rayonnement qui est capturé et détecté par un détecteur pour former un spectre. Il est d'une grande importance que l'étiquette fluorescente soit compatible et stable pour la réaction particulière et qu'elle soit correctement conjuguée à l'anticorps afin d'obtenir des résultats précis. L'un des fluorochromes les plus utilisés est l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC), qui est de couleur verte, avec une absorption et des longueurs d'onde de pic d'émission de 490 nm et 520 nm, respectivement. Rhodamine, un autre agent utilisé dans IF, est de couleur rouge et a une absorption et des longueurs d'onde de pic d'émission distinctes de 553 nm et 627 nm.

Qu'est-ce que l'immunohistochimie (IHC)?

IHC est une méthode de test moléculaire pratiqué afin d'identifier et de confirmer la présence de l'antigène dans la cellule cible. La cellule cible pourrait être une particule infectieuse, un pathogène microbien ou une cellule tumorale maligne. IHC utilise des anticorps monoclonaux et polyclonaux pour déterminer la présence d'antigènes présents sur la surface cellulaire des cellules cibles. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps. Un marqueur de détection est conjugué à ces anticorps afin de détecter la présence ou l'absence de l'antigène particulier. Ces marqueurs peuvent être des marqueurs chimiques tels que des enzymes, des anticorps étiquetés par fluorescence ou des anticorps marqués radio.

Figure 02: Slice du cerveau de souris colorée par immunohistochimie

L'application la plus populaire de l'IHC est dans la biologie des cellules cancéreuses pour identifier la présence de tumeurs malignes, mais elle est également utilisée pour la détection de maladies infectieuses.

Quelles sont les similitudes entre l'immunofluorescence et l'immunohistochimie?

• L'immunofluorescence et l'immunohistochimie ont lieu dans des conditions in vitro.
• Les deux techniques sont basées sur l'antigène-anticorps
• Les deux sont des techniques très rapides.
• Les résultats des techniques sont reproductibles.
• Les deux ont une meilleure qualité de données.
• Ces techniques utilisées dans le diagnostic pour le cancer et les maladies infectieuses.

Quelle est la différence entre l'immunofluorescence et l'immunohistochimie?

Résumé - Immunofluorescence vs immunohistochimie

Les mécanismes moléculaires ont provoqué de nombreux changements dans le domaine de la médecine, donnant lieu à des méthodes de test moléculaire avancées qui ont provoqué des révolutions dans le domaine du diagnostic. Ces inventions ont conduit à une identification et une confirmation rapides et précises de la maladie, permettant ainsi l'administration et la production de médicaments réussis. Ces techniques sont également utilisées en pharmacologie afin de trouver les cibles des médicaments et de confirmer les propriétés pharmacocinétiques du médicament pendant le métabolisme du médicament.  Si et IHC sont deux méthodes de diagnostic qui sont basées sur le concept de liaison de l'antigène et des anticorps, bien que le mode de détection dans les deux techniques diffère. Si utilise le principe de fluorescence pour détecter l'antigène et IHC utilise le concept de conjugaison chimique pour détecter l'antigène. C'est la différence entre si et ihc.

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Les références:

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2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. «Applications de l'immunohistochimie.»Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, août. 2012, disponible ici. Consulté le 25 août. 2017.

Image gracieuseté:

1. «Double coloration à l'immunofluorescence pour brdU, neun et gfap» par Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2nd, Liu X. - L'administration intranasale du facteur de croissance transformant Beta1 chez la souris après un AVC réduit le volume infarcatique et augmente la neurogenèse dans la zone sous-ventriculaire; PMID 19077183 (CC par 2.0) via Commons Wikimedia
2. «Hypothalamus d'un tissu de souris coloré par ABC-Immunohistochimie» par Zabbn - Propre travaux (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia