Différence entre la coloration à Gram et l'acide rapide

Différence clé - coloration à gramme vs acide rapidement
 

Les bactéries sont de très petits micro-organismes. Ils sont transparents et leur détection est difficile dans des conditions de vie et non colorées. Ainsi, diverses méthodes de coloration sont développées pour faciliter la détection bactérienne. Il existe trois principaux types de techniques de coloration: une coloration simple, une coloration différentielle et une coloration structurelle. La coloration différentielle est une technique qui utilise plus d'une tache pour différencier les bactéries. La coloration à grammes et les taches rapides sont connues le plus populaire sous le nom de taches différentielles. La coloration du Gram est une technique de coloration différentielle, qui sépare les bactéries en deux groupes appelés bactéries gram-positives et bactéries à Gram négatif. La coloration rapide acide est une tache différentielle utilisée pour identifier les organismes rapides tels que Mycobacterium à partir d'organismes rapides non acides. C'est la principale différence entre la coloration à Gram et l'acide rapide.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la tache Gram 
3. Qu'est-ce que l'acide rapide
4. Similitudes entre la coloration du Gram et l'acide rapide
5. Comparaison côte à côte - coloration à gramme vs acide rapidement sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que la tache Gram?

La coloration à Gram est une technique de coloration différentielle importante utilisée pour l'identification bactérienne en microbiologie. Cette technique a été introduite par le bactériologiste danois Hans Christian Gram en 1884. La coloration de gramme classe les bactéries en deux grands groupes nommés Gram positifs et Gram négatifs, qui sont très importants dans la classification et l'identification bactériennes. Les microbiologistes effectuent une coloration du Gram comme étape initiale dans la caractérisation bactérienne au cours de leurs études.

Les bactéries sont regroupées en fonction des différences dans leur paroi cellulaire. Les bactéries à Gram Positive sont composées d'une épaisse couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire tandis que les bactéries gram négatives sont composées d'une fine couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Le résultat de la coloration du Gram sera basé sur la différence d'épaisseur de la couche peptidoglycane de la paroi cellulaire.

La coloration des grammes est effectuée en utilisant quatre réactifs différents à savoir; coloration primaire, mordant, agent décolorisant et contre-taches. Crystal Violet et Safranin sont utilisés comme les taches primaires et contre-comptoir, respectivement tandis que les grammes d'iode et à 95% d'alcool sont utilisés comme mordant et décolorant, respectivement. Les étapes de base de la tache de grammes sont les suivantes;

1. Un frottis bactérien est préparé sur une lame de verre propre, la chaleur fixe et refroidie.
2. Le frottis est inondé de cristal violet pendant 1 à 2 minutes.
3. Le frottis est rincé avec de l'eau du robinet à course lente pour éliminer les taches excessives.
4. Grammes d'iode est appliqué au frottis pendant 1 minute.
5. Le frottis est rincé avec de l'eau du robinet à course lente
6. Le frottis est lavé avec de l'alcool à 95% pendant 2 à 5 secondes et rincé avec de l'eau du robinet à course lente.
7. Le frottis est comptoir taché de safranin pendant 1 minute
8. Le frottis est rincé à l'eau du robinet à course lente, séché et observé au microscope.

À la fin de la coloration à Gram, des bactéries à Gram négatif seront observées en couleur rose tandis que les bactéries grammes positives seront observées en couleur violette.

Figure 01: Gram négatif et bactéries à Gram positif

Le résultat de la tache de grammes est décidé par l'épaisseur de la couche peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Pendant l'étape de décoloration, la tache primaire et le mordant sont facilement retirés des bactéries à Gram négatif et deviennent incolores car ils ont une fine couche peptidoglycane. La tache primaire est conservée dans les bactéries à Gram positif car ils ont une couche de peptidoglycane épaisse. La coloration au comptoir ne sera pas efficace pour les bactéries à Gram positif en raison de la rétention de la tache primaire. Ainsi, les bactéries positives à Grams seront visibles dans la couleur de la coloration primaire, c'est-à-dire la couleur violette. La contre-tache colorera les bactéries à Gram négatif, et ils seront visibles dans la couleur de pick, qui est la couleur safranin. Par conséquent, il est facile de classer les bactéries en deux groupes par coloration à Gram et il est précieux dans la différenciation bactérienne et l'identification.

Qu'est-ce que l'acide rapide?

La sauvetage acide est une propriété physique de certaines bactéries, en particulier leur résistance à la décoloration par les acides pendant les procédures de coloration. Une fois tachés, ces organismes résistent à des procédures de décoloration à base d'acide dilué et / ou d'éthanol communes dans de nombreux protocoles de coloration. Ainsi, le nom «acide rapide» est donné à ces organismes. Cette propriété est représentée en raison d'avoir un niveau élevé de matériau cireux (acides mycolique) dans leurs parois cellulaires. Ce test est essentiel pour l'identification de Mycobacterium tuberculosis.

Figure 2: Mycobactéries rapides acides

Cette coloration rapide acide a été développée par Paul Ehrlich en 1882. La technique rapide acide d'acide d'Ehrlich a été modifiée par Ziehl-Neelsen et il est maintenant utilisé plus fréquemment. La procédure de coloration rapide acide implique trois réactifs différents. Carbol Fuschin est utilisé comme tache principale. L'alcool acide est utilisé comme agent décolorant. Le bleu de méthylène est utilisé comme coup de comptoir. La procédure de coloration est effectuée comme suit.

1. La tache primaire (Carbol fuchsin) est appliquée sur l'échantillon fixe sur la diapositive (toutes les cellules seront colorées en couleur rouge).
2. La diapositive est chauffée par la vapeur pendant 5 minutes, ce qui entraîne correctement les taches dans les cellules.
3. Ensuite, la solution de décoloration est ajoutée (cela élimine le colorant rouge de toutes les cellules à l'exception des bactéries rapides acides).
4. Le bleu de méthylène est ajouté comme une tache de comptoir (il colore toutes les cellules bactériennes décolorisées).
5. Les bactéries rapides acides restent rouges tandis que les bactéries rapides non acidies sont en bleu.

Quelles sont les similitudes entre la coloration à Gram et l'acide rapide?

• La coloration à Gram et l'acide rapide sont deux techniques de coloration différentielle.
• Les deux techniques classent les bactéries en deux groupes.
• Les deux techniques utilisent deux taches et une décoloration.

Quelle est la différence entre la coloration à Gram et l'acide rapide?

Résumé - Tache de gramme vs acide rapidement

La visualisation des micro-organismes à l'état vivant est difficile. Par conséquent, les taches biologiques et les procédures de coloration sont largement utilisées pour étudier leurs propriétés. La coloration différentielle est un type de technique de coloration utilisée pour différencier les bactéries. Coloration à gramme et coloration rapide acide sont deux techniques de coloration différentielle. La coloration à gramme différencie les bactéries à Gram négative et les bactéries à Gram positif en fonction de l'épaisseur de leurs parois cellulaires. La coloration rapide à l'acide différencie les bactéries rapides acides des bactéries rapides non acides basées sur la teneur en acide mycolique dans la paroi cellulaire. C'est la différence entre l'acide rapide et les teintes à Gram.

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Les références:

1. Areal, Sagar. «Principe, procédure, interprétation et exemples de procédure, d'interprétation et d'exemples.«Notes de microbiologie en ligne. N.p., 08 mai 2017. la toile. Disponible ici. 20 juillet 2017.
2. Capistes différentielles pour identifier les bactéries: gramme, acide et endospore. N.p., n.d. la toile. Disponible ici. 20 juillet 2017.

Image gracieuseté:

1. «Nœud lymphatique - Infection mycobactérienne atypique (MAI) - tache AFB» par Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) via Flickr
2. «Gram Stain 01» par Y Tambe - le fichier de Y Tambe (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia