Différence entre électrophorèse et électroosmose

Électrophorèse vs électroosmose

Les méthodes de séparation physique comme le filtrage, la distillation, la chromatographie sur la colonne ne sont pas des méthodes faciles à la séparation de certaines molécules. L'électrophorèse et l'électro-osmose sont deux autres techniques de séparation qui peuvent être utilisées pour séparer les particules chargées.

Qu'est-ce que l'électrophorèse?

L'électrophorèse est une technique de séparation des molécules en fonction de leurs tailles. La charge de la molécule est fondamentale pour cette séparation et leur capacité à se déplacer dans un champ électrique. Il s'agit de la technique la plus courante et la plus principale en biologie moléculaire pour séparer les molécules, en particulier l'ADN et les protéines. Ceci est principalement utilisé car il est relativement facile et peu coûteux. L'appareil pour l'électrophorèse peut être un peu compliqué, et la préparation prend un certain temps. Mais nous pouvons facilement faire un appareil d'électrophorèse à partir des choses que nous avons en laboratoire. Les techniques d'électrophorèse peuvent varier en fonction de nos objectifs. Nous pouvons utiliser une électrophorèse unidimensionnelle pour la séparation de l'ADN ou de la protéine. L'électrophorèse en deux dimensions est utilisée lorsque des échantillons plus résolus sont nécessaires (comme dans le cas de l'impression des doigts). Un gel est utilisé comme milieu de support pour séparer les molécules. Ce gel peut être préparé sous forme de feuilles plates ou dans des tubes. La base de cette procédure consiste à séparer les molécules en fonction de leur taux de mouvement à travers un gel lorsqu'un champ électrique est fourni. Les molécules chargées négativement comme l'ADN ont tendance à se déplacer vers le pôle positif dans ce champ électrique tandis que les molécules chargées positivement ont tendance à se rendre au pôle négatif. Deux types de gels sont utilisés dans l'électrophorèse comme agarose et polyacrylamide. Ces deux ont des pouvoirs de résolution différents. Le gel agit comme un tamis pour filtrer les différentes tailles de molécules. Les charges électrostatiques mises en place dans le gel agissent comme la force.

La séparation dépend de la mobilité des ions.

F = fv = zee

V = zee / f

F = force agissant sur une particule

F = coefficient de friction

V = vitesse de migration moyenne

Z = charge de la particule migrateuse

E = charge élémentaire

E = force du champ électrique

Les conditions nécessaires à l'électrophorèse sont relativement simples. Lors de la fabrication du gel et de l'exécution de l'échantillon, un tampon est utilisé. Des marqueurs et des colorants sont utilisés à des fins de visualisation.

Qu'est-ce que l'électro-osmose?

C'est le processus de déplacement d'un liquide à travers un matériau à l'aide d'un champ électrique appliqué. Le mouvement peut se passer d'un matériau poreux, le long d'une membrane capillaire, etc. Cela peut être utilisé comme technique de séparation (en particulier l'électro-osmose capillaire). La vitesse du liquide est linéairement proportionnelle au champ électrique appliqué. Il dépend également du matériau utilisé pour construire le canal et la solution utilisée. Dans l'interface, la solution et le matériau ont obtenu des charges opposées et, c'est connu comme une double couche électrique. Lorsqu'un champ électrique est appliqué à la solution, la double couche électrique se déplace par la force Coulomb résultante. Ceci est connu comme le flux électro-osmotique.