Quelle est la différence entre Elisa et Elispot

Le différence clé entre Elisa et Elispot est que ELISA est un essai immuno-enzymatique lié à l'enzyme qui détermine la concentration totale de protéines de signalisation sécrétées, tandis qu'Elispot est un test immunosorbant lié à l'enzyme qui détecte les cellules sécrétant des cytokines individuelles.

ELISA et ELISPOT sont deux tests immunosorbants liés à l'enzyme largement utilisés en médecine, pathologie végétale, biotechnologie et différentes industries pharmaceutiques. Dans ces techniques, un analyte de protéines est détecté par un anticorps dirigé contre elle. ELISA est le test immuno-enzyme le plus populaire utilisé dans les laboratoires. D'un autre côté, Elispot est un essai immuno-enzymatique lié à l'enzyme qui n'est pas utilisé à la place d'Elisa mais plutôt utilisé en plus d'Elisa dans les laboratoires.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que Elisa
3. Qu'est-ce qu'Elispot
4. Similitudes - Elisa et Elispot
5. Elisa vs elispot sous forme tabulaire
6. Résumé - Elisa vs Elispot

Qu'est-ce que le test ELISA?

ELISA est un essai immuno-enzymatique lié à l'enzyme qui détermine la concentration totale de protéines de signalisation sécrétées. Il s'agit d'un test de biochimie analytique largement utilisé qui a été décrit pour la première fois par Engvall et Perlmann en 1971. Cette technique utilise un type d'immunodosage enzymatique en phase solide pour détecter la présence d'une protéine spécifique dans un échantillon liquide en utilisant des anticorps dirigés contre cette protéine spécifique. Ce test est un outil de diagnostic couramment utilisé en médecine, pathologie végétale et biotechnologie.

Mécanisme du test ELISA

Dans la plupart du test ELISA, une quantité inconnue d'antigène est immobilisée sur un support solide (plaque de microlitre) au début. Ensuite, l'anticorps primaire correspondant est appliqué sur la surface de support solide. Cet anticorps forme un complexe avec l'antigène (complexe antigène-anticorps). L'anticorps primaire lié à l'antigène peut être détecté par un anticorps secondaire lié à une enzyme par bioconjugation. Dans la dernière étape du test ELISA, une substance contenant le substrat de l'enzyme est ajoutée. S'il y a une liaison appropriée d'un anticorps primaire avec l'antigène, un changement de couleur détectable est produit par le substrat. En fin de compte, cela quantifie l'antigène dans l'échantillon.

Figure 01: différents types d'Elisa

En outre, il existe différentes approches d'Elisa, comme l'ELISA directe et l'ELISA indirecte. Actuellement, divers tests ELISA sont utilisés pour détecter les agents pathogènes humains comme Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus de l'hépatite B, virus de l'hépatite C, produisant des entérotoxines E.coli, VIH et SARS-COV-2.

Qu'est-ce que le test ELISPOT?

ELISPOT est un test immunosorbant lié à l'enzyme qui détecte les cellules sécrétant des cytokines individuelles. Cecil Czerkinsky a décrit Elispot pour la première fois en 1983. Il s'agit d'un type de test qui se concentre sur la mesure quantitative de la fréquence de la sécrétion de cytokines pour une seule cellule. Il est également classé comme une technique qui utilise des anticorps pour détecter un analyte protéique biologique ou chimique. Le test FluoroSpot est une variation du test ELISPOT, qui utilise la fluorescence afin d'analyser plusieurs analytes (protéines plus secrètes).

Mécanisme du test ELISPOT

Dans ce mécanisme, des anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines sont ajoutés aux puits des plaques de microlitre initialement. Ensuite, les cellules souhaitées observées sont ajoutées aux puits. Plus tard, les cellules sont incubées. Pendant l'incubation cellulaire, les cellules peuvent réagir à tous les stimuli et sécréter des cytokines. Les cytokines qui ont été sécrétées par les cellules incubées se fixeront aux anticorps car les cellules sont entourées d'anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines.

Figure 02: test ELISPOT

Pour détecter ces anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines, des anticorps de détection spécifiques biotinylés sont ajoutés au puits. Les anticorps de détection spécifiques biotinylés capturent les anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines dans les puits. De plus, des conjugués en streptavidin-enzyme sont ajoutés aux puits afin de se lier aux anticorps de détection. Dans la dernière étape, des substrats spécifiques sont ajoutés aux puits. Les réactions des conjugués et substrats enzymatiques produisent des taches distinctes dans les puits. Ces taches distinctes sont lues sur un lecteur ELISPOT automatisé. En fin de compte, cela calculera davantage la fréquence de la sécrétion de cytokines.

Quelles sont les similitudes entre Elisa et Elispot?

• Ce sont tous deux des tests immunosorbants liés à l'enzyme.
• Les deux tests détectent des analytes protéiques spécifiques.
• Ces tests utilisent des anticorps spécifiques pour identifier les analytes protéiques.
• Les deux tests utilisent des enzymes et des substrats.
• Ils sont utilisés comme outil de diagnostic dans les laboratoires médicaux.

Quelle est la différence entre Elisa et Elispot?

ELISA est un essai immuno-enzymatique lié à l'enzyme qui détermine la concentration totale de protéines de signalisation sécrétées. D'un autre côté, ELISPOT est un essai immuno-enzymatique qui mesure les cellules sécrétant des cytokines individuelles. C'est donc la principale différence entre Elisa et Elispot. De plus, dans le test ELISA, l'antigène est d'abord immobilisé sur les puits de microlitre. En revanche, dans le test ELISPOT, l'anticorps est d'abord immobilisé sur les puits de microlitre. Ainsi, c'est une autre différence entre Elisa et Elispot.

L'infographie ci-dessous présente une analyse détaillée de la différence entre ELISA et ELISPOT sous forme tabulaire.

Résumé - Elisa vs Elispot

ELISA et ELISPOT sont deux tests immunosorbants liés à l'enzyme largement utilisés en médecine, pathologie végétale, biotechnologie et différentes industries pharmaceutiques. ELISA détecte la présence d'un ligand (protéine) dans un échantillon liquide à l'aide d'anticorps dirigés contre le ligand à mesurer. Le test ELISPOT est une méthode largement utilisée pour surveiller les réponses immunitaires. Il détecte des cellules sécrétant des cytokines individuelles en utilisant des anticorps. C'est à la fois une technique d'immunoessai et de bioalien. Ainsi, c'est le résumé de la différence entre Elisa et Elispot.

Référence:

1. Horlock, Claire. «Dosage immunosorbant lié à l'enzyme (ELISA).«British Society for Immunology.
2. «Elispot.”Sciencedirect sujets.

Image gracieuseté:

1. «Types Elisa» par Allan.Richard5093 - Propre travaux (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia
2. «Elispot-en» par Dadofbeanandbug - Ce fichier a été dérivé de: Elispot.png (cc by-sa 3.0) via Commons Wikimedia