Les vecteurs sont utilisés dans le clonage moléculaire. Un vecteur peut être défini comme une molécule d'ADN qui se comporte comme un véhicule pour transporter du matériel génétique étranger dans une autre cellule. Un vecteur contenant de l'ADN étranger est connu sous le nom d'ADN recombinant et il devrait avoir la capacité de le répliquer et de l'exprimer dans l'organisme hôte. Chromosome artificiel de levure (YAC) et Chromosome artificiel bactérien (BAC) sont deux types de vecteurs impliqués dans le clonage. La principale différence entre YAC et BAC est que YAC est un système vectoriel artificiellement construit en utilisant une région spécifique de chromosome de levure pour insérer de grands segments de matériaux génétiques aux cellules de levure alors que BAC est un système vectoriel artificiellement construit en utilisant une région spécifique de E. coli chromosome pour insérer de grands segments d'ADN dans E. coli cellules.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Quels sont les vecteurs YAC
3. Que sont les vecteurs BAC
4. Comparaison côte à côte - vecteurs YAC vs BAC
5. Résumé
YAC (levure chromosome artificiel) est un chromosome artificiellement construit qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de reproduire dans les cellules de levure. Il a un centromère, des télomères ainsi que des séquences de réplication de manière autonome qui sont essentielles à la réplication et à la stabilité. YAC doit également supporter un marqueur ou des marqueurs sélectifs et des sites de restriction pour en faire un vecteur de clonage efficace. Une grande séquence allant de 1000 kb à 2000 kb peut être insérée dans le YAC et transférée dans la levure. L'efficacité de transformation de YAC est très faible.
Figure 01: vecteur YAC
Le chromosome artificiel bactérien (BAC) est un chromosome artificiellement construit pour le clonage moléculaire. Il a des régions spécifiques de E. coli F plasmide et il est circulaire et super enroulé. BAC est développé pour cloner les fragments d'ADN aux bactéries, en particulier pour E. coli. Il peut supporter des fragments d'ADN ayant des tailles jusqu'à 300 Ko. Comparé au YAC, les inserts de clonage BAC sont plus petits en tailles. Les BAC ont été développés en 1992 et il est toujours populaire en raison de sa stabilité et de sa facilité de construction. Les BAC sont également utiles pour développer des vaccins.
Figure 02: vecteur de bac en clonage moléculaire
Vecteurs YAC vs BAC | |
YAC est un chromosome génétiquement modifié avec l'utilisation de l'ADN de levure dans le but de cloner. | BAC est une molécule d'ADN génétiquement modifiée en utilisant E. coli ADN à des fins de clonage. |
Genre | |
Les YAC ont été conçus pour cloner de grands fragments d'ADN génomique dans la levure. | Les BAC ont été développés pour cloner de grands fragments génomiques dans Escherichia coli. |
Longueur d'insertion | |
Les YAC peuvent contenir des inserts génomiques de la taille d'une mégabase.(1000 Ko - 2000 Ko). | Les BAC peuvent transporter des inserts de 200 à 300 kb ou moins. |
Construction | |
L'ADN YAC est difficile à purifier intact et nécessite une concentration élevée pour générer un système vectoriel YAC. | BAC est facile à purifier intact et peut être facilement construit. |
Chimérisme | |
Les YAC sont souvent chimériques. | Les bacs sont rarement chimériques. |
La stabilité | |
YAC est instable. | BAC est stable. |
Modifications | |
La recombinaison des levures est très réalisable et reste toujours active. Par conséquent, il peut générer des suppressions et d'autres réarrangements dans un YAC. | E. coli La recombinaison est empêchée et est activée en cas de besoin. Par conséquent, il réduit les réarrangements indésirables dans BACS. |
Entretien | |
La manipulation des YAC recombinants nécessite généralement le transfert de YAC dans E. coli pour la manipulation ultérieure. Par conséquent, c'est un processus laborieux. | La modification de BAC se produit directement dans E. coli. Il n'y a donc pas besoin de transfert d'ADN. Par conséquent, le processus n'est pas laborieux. |
YAC est devenu un outil de recherche essentiel dans les processus de clonage en raison de sa capacité à cloner de grands fragments d'ADN dans l'organisme hôte. Cependant, les YAC ont plusieurs inconvénients en tant que vecteurs tels que les difficultés de construction, le chimérisme, l'instabilité, etc. Par conséquent, pour surmonter ces problèmes, les scientifiques ont développé des vecteurs BAC. BAC a été construit en utilisant des régions spécifiques de E. coli chromosome. C'est un vecteur stable et peut facilement être construit. Cependant, la longueur de l'ADN que BAC peut gérer est jusqu'à 20 fois moins que celle de YAC. C'est la différence entre les systèmes vectoriels YAC et BAC. De nos jours, BAC est plus préféré aux YAC dans les laboratoires.
Les références
1. Shero, J. H., M. K. McCormick, S. E. Antonarakis et P. Hieter. «Vecteurs chromosomiques artificiels de levure pour une manipulation et une cartographie efficaces.”Génomique.U.S. Bibliothèque nationale de médecine, juin 1991. la toile. 25 mars. 2017
2. Ramsay, m. «Clonage des chromosomes artificiels de levure.«Biotechnologie moléculaire. U.S. Bibliothèque nationale de médecine, avril. 1994. la toile. 25 mars. 2017
Image gracieuseté:
1.«Bacs Cloning Vecteurs Chem114a» par Tinastella - (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia