Différence entre RP HPLC et HIC
Le différence clé Entre RP HPLC et HIC est que RP HPLC utilise une phase mobile plus polaire et une phase stationnaire moins polaire. Tandis que le HIC utilise une phase stationnaire hydrophobe qui permet aux molécules hydrophobes de s'y fixer.
La chromatographie est une technique analytique qui aide à séparer un mélange en ses composants. Tout d'abord, nous devons dissoudre l'échantillon pour être séparé en solution. Ce mélange de substances de solution est appelé la phase mobile. Ensuite, la phase mobile est passée à travers un autre matériau appelé la phase stationnaire. La phase stationnaire détermine la séparation des composants. La séparation se produit en raison du partitionnement du matériel entre la phase mobile et la phase stationnaire.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que RP HPLC
3. Qu'est-ce que Hic
4. Comparaison côte à côte - RP HPLC VS. Hic sous forme tabulaire
5. Résumé
Qu'est-ce que RP HPLC?
Le terme RP HPLC représente Chromatographie liquide à haute performance à phase inverse. Il s'agit de séparation des composants dans un mélange, selon l'hydrophobicité. Les composants hydrophobes de la phase mobile se lient avec les ligands hydrophobes immobilisés sur la phase stationnaire, tandis que les composants hydrophiles s'éteignent à travers la phase stationnaire sans s'attacher à la surface de la phase stationnaire.
Figure 01: Appareil HPLC
De plus, cette méthode a plus de reproductibilité par rapport aux autres techniques chromatographiques, et elle montre également une large applicabilité. Par conséquent, nous utilisons cette méthode dans les laboratoires pour plus de 75% de toutes les méthodes HPLC. La plupart du temps, nous utilisons un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible comme phase mobile. Ainsi, il assurera la fixation des composants hydrophobes dans la solution à la surface de la phase stationnaire.
Qu'est-ce que Hic?
Le terme HIC représente Chromatographie d'interaction hydrophobe. Il s'agit d'un type de phase inverse HPLC, et cette méthode est principalement utilisée pour la séparation de grandes biomolécules telles que les protéines. Dans cette méthode, nous devons utiliser un milieu aqueux pour faire l'échantillon de la biomolécule. C'est parce que les solvants organiques peuvent provoquer une dénaturation des protéines. De plus, cette technique utilise l'interaction entre les grandes molécules avec une surface légèrement hydrophobe de la phase stationnaire. De plus, nous devons utiliser une concentration élevée de sel dans l'échantillon car il encourage les protéines à être conservées sur l'emballage; Ce processus est appelé le salting. En diminuant progressivement la concentration de sel, nous pouvons faire en sorte que les biomolécules s'éteignent séparément en fonction de leur hydrophobicité.
Habituellement, cette méthode utilise les conditions opposées à celles de la chromatographie d'échange d'ions. Dans cette technique, nous devons d'abord passer une solution tampon à travers la colonne afin de réduire la solvatation du soluté dans l'échantillon. Il fait exposer les régions hydrophobes de la protéine. Cependant, lorsque la molécule est plus hydrophobe, moins de sel est nécessaire pour promouvoir la liaison. Ici, les solutés moins hydrophobes sont élués en premier, et selon le changement de concentration en sel, plus de solutés hydrophobes sont élués dernier.
Quelle est la différence entre RP HPLC et HIC?
La chromatographie est une technique analytique pour la séparation des composants dans un mélange. RP HPLC et HIC sont deux techniques chromatographiques spécialisées. La principale différence entre RP HPLC et HIC est que RP HPLC utilise une phase mobile plus polaire et une phase stationnaire moins polaire, tandis que HIC utilise une phase stationnaire hydrophobe, qui permet aux molécules hydrophobes de s'y attacher.
L'infographie ci-dessous résume la différence entre RP HPLC et HIC.
Résumé - RP HPLC VS. HIC
La chromatographie est une technique analytique pour la séparation des composants dans un mélange. RP HPLC et HIC sont deux techniques chromatographiques spécialisées. La principale différence entre RP HPLC et HIC est que RP HPLC utilise une phase mobile plus polaire et une phase stationnaire moins polaire, tandis que HIC utilise une phase stationnaire hydrophobe, qui permet aux molécules hydrophobes de se fixer.
Référence:
1. «Modes de séparation HPLC.”Waters, disponible ici.
Image gracieuseté:
1. «Préparation HPLC» de Gyassinemrabettalk✉ Cette image vectorielle non spécifiée W3C a été créée avec Inkscape. - Propre travail (CC par 3.0) via Commons Wikimedia
