Différence entre la phase inverse et la phase normale HPLC

Le différence clé entre la phase inverse et la phase normale HPLC est que le La phase inverse HPLC utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire tandis que la phase normale HPLC utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire.

La phase normale HPLC est la technique la plus ancienne de HPLC que TSWett a utilisée dans ses séparations d'extraits de plantes; Il a utilisé la craie dans une colonne de verre. C'était le mode classique de chromatographie qui a conduit à le nommer comme la technique «normale». Le HPLC en phase inversée, en revanche, est l'opposé de la technique normale, que les scientifiques ont développé récemment.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la phase inverse HPLC
3. Qu'est-ce que la phase normale HPLC
4. Comparaison côte à côte - phase inverse vs phase normale HPLC sous forme tabulaire
5. Résumé

Qu'est-ce que la phase inverse HPLC?

La phase inverse HPLC est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. Parmi toutes les méthodes HPLC, nous utilisons cette méthode pour environ 70% en raison de sa large applicabilité et de sa reproductibilité. La phase stationnaire est non polaire et la phase mobile est polaire.

La plupart du temps, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible, comme l'acétonitrile ou le méthanol comme phase mobile. Par conséquent, les analytes interagissent avec la phase stationnaire non polaire.

Qu'est-ce que la phase normale HPLC?

La phase normale HPLC est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophile. C'est la méthode traditionnelle de HPLC, bien que nous ne l'utilisions pas autant. La phase stationnaire est polaire et la phase mobile est non polaire. Plus important encore, la phase mobile de cette technique est 100% organique. Cela signifie qu'aucune eau n'est utilisée pour cela.

Figure 01: Un profil d'échantillon pour les chromatogrammes HPLC phase et inverse en phase inverse en fonction de la polarité des composants dans l'analyte.

En règle générale, la phase stationnaire contient des phases de silice, cyano, diol, amino, etc. Les phases mobiles incluent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. Cette technique se fonde sur la rétention de molécules de solvant ou d'analyte sur la phase stationnaire polaire.

Quelle est la différence entre la phase inverse et la phase normale HPLC?

La phase inverse HPLC est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. La phase stationnaire de cette technique est non polaire tandis que la phase mobile est polaire. De plus, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible, comme l'acétonitrile ou le méthanol comme phase mobile en phase inverse HPLC. En revanche, la phase normale HPLC est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophile. La phase stationnaire de cette technique est polaire tandis que la phase mobile est non polaire. En plus de cela, les scientifiques utilisent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. Comme la phase mobile de la phase normale HPLC. L'infographie ci-dessous présente la différence entre la phase inverse et la phase normale HPLC sous une forme tabulaire.

Résumé - Phase inverse vs phase normale HPLC

Phase inverse et phase normale Les techniques HPLC sont deux techniques chromatographiques liquides. La principale différence entre la phase inverse et la phase normale HPLC est que la phase inverse HPLC utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire tandis que la phase normale HPLC utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire.

Référence:

1. Des eaux. «Modes de séparation HPLC.”HPLC - Chromatographie liquide haute performance expliquée: eaux. Disponible ici