Différence entre la culture cellulaire primaire et secondaire

Différence clé - Culture cellulaire primaire vs secondaire
 

Avant de discuter de la différence entre la culture cellulaire primaire et secondaire, définissons d'abord brièvement ce qu'est la culture cellulaire. La culture cellulaire est le processus d'élimination des cellules d'un animal ou d'une plante et une croissance ultérieure dans un environnement contrôlé artificiellement. Les cellules pourraient être directement retirées du tissu et désagrégées par des méthodes enzymatiques ou mécaniques ou pourraient être dérivées d'une culture qui a déjà été établie. La principale différence entre la culture cellulaire primaire et secondaire est que Les cellules de la culture cellulaire primaire sont obtenues directement à partir d'un tissu animal ou végétal, alors que Les cellules de la culture cellulaire secondaire sont obtenues à partir d'une culture primaire déjà établie. Par conséquent, la culture secondaire est une nouvelle culture provenant de la culture primaire.

Voyons plus loin dans le sens de la culture cellulaire primaire et secondaire afin de mieux les différencier.

Qu'est-ce que la culture cellulaire primaire?

La culture des cellules primaires est la disassociation des cellules d'un animal parental ou d'un tissu végétal par des mesures enzymatiques ou mécaniques et en maintenant la croissance des cellules dans un substrat approprié dans des récipients en verre ou en plastique dans des conditions environnementales contrôlées. Les cellules de la culture primaire ont le même caryotype (nombre et apparition de chromosomes dans le noyau d'une cellule eucaryote) que ces cellules dans le tissu d'origine. La culture des cellules primaires pourrait être classée en deux en fonction du type de cellules utilisées dans la culture.

• Cellule dépendante de l'ancrage ou adhérente - ces cellules nécessitent un attachement pour la croissance. Les cellules adhérentes sont généralement dérivées de tissus d'organes, par exemple du rein où les cellules sont immobiles et incorporées dans le tissu conjonctif.

• Cellules indépendantes ou suspendues de l'ancrage - ces cellules ne nécessitent pas d'attachement pour la croissance. En d'autres termes, ces cellules ne se fixent pas à la surface du navire de culture. Toutes les cultures de suspension sont dérivées de cellules du système sanguin; Par exemple, les lymphocytes de globules blancs sont en suspension dans le plasma.

Les cellules dérivées de cultures primaires ont une durée de vie limitée. Les cellules ne peuvent pas être tenues indéfiniment pour plusieurs raisons. L'augmentation du nombre de cellules dans la culture primaire entraînera l'épuisement du substrat et des nutriments. De plus, l'activité cellulaire augmentera progressivement le niveau de métabolites toxiques dans la culture inhibant la croissance cellulaire.

À ce stade, une sous-culture secondaire ou une sous-culture doit être effectuée pour assurer une croissance cellulaire continue.

Qu'est-ce que la culture cellulaire secondaire?

Comme décrit ci-dessus, lorsque les cellules des cultures adhérentes occupent tous les substrats disponibles ou lorsque les cellules des cultures de suspension dépassent la capacité du milieu à soutenir une croissance plus approfondie, la prolifération cellulaire commence à réduire ou à cesser entièrement. Afin de maintenir une densité cellulaire optimale pour une croissance continue et pour stimuler une prolifération supplémentaire, la culture primaire doit être subculturée. Ce processus est connu comme culture cellulaire secondaire.

Pendant la culture cellulaire secondaire, les cellules de la culture primaire sont transférées dans un nouveau navire avec un moyen de croissance frais. Le processus consiste à éliminer les milieux de croissance précédents et à dissocier les cellules adhérées dans les cultures primaires adhérentes. La culture des cellules secondaires est périodiquement nécessaire pour fournir aux cellules des espaces de croissance et des nutriments frais, prolongeant ainsi la durée de vie des cellules et élargissant un certain nombre de cellules dans la culture.

Culture secondaire Un certain volume d'une culture primaire en un volume égal de moyen de croissance frais permet un maintien à long terme des lignées cellulaires. La culture secondaire dans un plus grand volume de milieu de croissance frais est pratiquée pour augmenter le nombre de cellules, par exemple dans les processus industriels ou les expériences scientifiques.

Quelle est la différence entre la culture cellulaire primaire et la culture cellulaire secondaire?

Comme nous avons maintenant compris les deux termes séparément, nous comparerons les deux afin de trouver d'autres différences entre eux.

Quand utiliser la culture cellulaire primaire et / ou secondaire

Cela dépend de ce que vous voulez apprendre et du type d'expérience que vous effectuez.

Culture cellulaire primaire: C'est le processus à utiliser pour cultiver les cellules du tissu parental en préoccupation. Les cellules de la culture primaire auront une durée de vie finie en raison de l'épuisement du substrat et des nutriments et de l'accumulation de toxines, avec une croissance démographique. La culture primaire, malgré les techniques de séparation utilisées dans le processus d'isolement, peut contenir plusieurs types de cellules. Cependant, cela pourrait ne pas être un problème dans tous les types d'expériences et dans de tels cas, la culture principale peut être utilisée à elle seule.

Culture cellulaire secondaire:  Habituellement, le nombre de cellules obtenues à partir de la culture primaire est insuffisante dans les expériences. La culture cellulaire secondaire donne la possibilité d'étendre la population cellulaire et aussi de prolonger la durée de vie. Il permet une sélection supplémentaire de cellules avec l'utilisation d'un milieu sélectif et permet une uniformité génotypique et phénotypique dans la population. Ce processus est utilisé pour générer des cultures répliquées pour la caractérisation de base, la préservation et l'expérimentation.

Ressemblance avec le tissu parental

Culture cellulaire primaire: Les cellules de la culture cellulaire primaire sont directement obtenues à partir d'un tissu animal ou végétal. Par conséquent, les cellules de la culture primaire ressemblent étroitement à son tissu parental et en conséquence, la réponse biologique peut être plus proche d'une situation in vivo que celle d'une culture cellulaire secondaire.

Culture cellulaire secondaire: La culture cellulaire secondaire provient d'une culture cellulaire primaire. Bien que la substitution prolonge la durée de vie des cellules, il est possible qu'après quelques phases, les cellules puissent être transformées ou pour perdre le contrôle de ne pas diviser plus d'une certaine fois. Cela pourrait être dû à des mutations ou à des altérations génétiques des cellules primaires pendant la sous-culture. Par exemple, certains micro-organismes ont tendance à s'adapter aux conditions de culture, qui est principalement différente de leur environnement naturel, en modifiant leur biologie.

Processus de culture - obtenir des cellules

Culture cellulaire primaire: Dans la culture cellulaire primaire, les tissus animaux ou végétaux passeront par des phases de rinçage, de dissection et de désagrégation mécanique ou enzymatique. Les tissus désagrégés contiennent une variété de types de cellules différents, ce qui peut nécessiter l'adoption d'une technique de séparation afin d'isoler les cellules d'intérêt.

Culture cellulaire secondaire: Dans la culture cellulaire secondaire, si la culture primaire est une culture adhérente, la première étape consiste à détacher les cellules de l'attachement (surface du récipient de culture) par des moyens mécaniques ou enzymatiques. Ensuite, les cellules doivent être détachées les unes des autres pour former une suspension unique.

Nombre de cellules en culture

Culture cellulaire primaire: Il n'est pas souhaitable d'avoir une suspension absolue unique, car de nombreuses cellules primaires survivent mieux dans les petits grappes.

Culture cellulaire secondaire: Il suffit de générer une suspension unique.

Vie de la culture

Culture cellulaire primaire: Les cultures de cellules primaires ont une durée de vie finie. Comme expliqué ci-dessus, c'est parce que la croissance des cellules épuise le substrat et les nutriments et conduit à l'accumulation de métabolites toxiques. En conséquence, le taux de croissance des cellules baisse progressivement, conduisant à la mort des cellules.

Culture cellulaire secondaire: La culture cellulaire secondaire prolonge la durée de vie des cellules. La sous-culture périodique peut produire des cellules immortelles par transformation ou altération génétique des cellules primaires.

Risque de contamination

Culture cellulaire primaire: Les cultures de cellules primaires sont plus difficiles à prendre en charge. Généralement, les cultures de cellules primaires ont besoin d'un riche mélange d'acides aminés, de micronutriments, de certaines hormones et de facteurs de croissance. En conséquence, le risque de contamination dans les cultures de cellules primaires est supérieure à celle des cultures de cellules secondaires.

Culture cellulaire secondaire: Les cultures de cellules secondaires sont relativement faciles à maintenir, et le risque de contamination est inférieur aux cultures de cellules primaires.

Dans cet article, nous avons tenté de comprendre les termes la culture cellulaire primaire et la culture cellulaire secondaire suivie d'une comparaison pour mettre en évidence les différences clés entre elles. La différence fondamentale réside dans la façon dont les cellules sont dérivées de la culture; Les cellules de la culture cellulaire primaire sont obtenues directement à partir d'un tissu animal ou végétal, tandis que les cellules de la culture cellulaire secondaire sont obtenues à partir d'une culture primaire déjà établie.

Les références: Bases sur la culture cellulaire - Un manuel de Invitrogen et Gibco Freshney, R. je. (2006). Principes de base de la culture cellulaire. Centre d'oncologie et de pharmacologie appliquée.   Image gracieuseté: «Culture cellulaire» par Umberto Salvagnin (CC par 2.0) via Flickr