Différence entre la phusion et la polymérase Taq

Différence clé - Phusion vs Taq Polymérase
 

Les ADN polymérases sont des enzymes largement utilisées dans les techniques de biologie moléculaire et sont également naturellement présents dans tous les organismes qui subissent une réplication de l'ADN. Ce sont les principales enzymes polymérisantes qui impliquent pendant la réplication. L'ADN polymérase est capable d'ajouter des nucléotides à l'extrémité libre 3 'du brin d'ADN, provoquant ainsi l'extension d'un nouveau brin. À l'heure actuelle, en raison des développements de la biologie moléculaire dans les diagnostics de la maladie et les applications industrielles, il est important de fabriquer des polymérases ayant diverses propriétés bénéfiques. Cela augmente la précision de la méthode et en fait une technique plus rapide. La phusion et la polymérase Taq sont deux enzymes polymérases thermostables produites commercialement qui sont utilisées dans des applications moléculaires spéciales. La phusion est une ADN polymérase isolée de Pyrococcus furiosus et est principalement utilisé dans les expériences de clonage pour augmenter la fidélité. L'ADN polymérase TAQ est la ADN polymérase standard utilisée dans la réaction en chaîne par polymérase (PCR), et elle est isolée de la bactérie thermostable; Thermus aquaticus. Le différence clé Entre les deux enzymes se trouve le micro-organisme source. La phusion est isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus tandis que la polymérase Taq est isolée du thermophile, Thermus aquaticus.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la phusion
3. Qu'est-ce que la polymérase Taq
4. Similitudes entre la phusion et la polymérase Taq
5. Comparaison côte à côte - phusion vs Taq polymérase sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que la phusion?

Phusion de l'ADN polymérase est une nouvelle polymérase fabriquée en isolant l'enzyme de Pyrococcus furiosus, qui est une archaea extra-extra-extrémiste. Ces microbes résident dans des conditions extrêmement à haute température, faisant ainsi de la polymérase une polymérase hautement stable à la chaleur. La phusion polymérase est utilisée pour obtenir une fidélité extrême sur la polymérase thermostable conventionnelle; Taq polymérase. La phusion polymérase est capable d'amplifier les modèles longs jusqu'à 7.5KB d'ADN génomique. La capacité de polymérisation optimale de la polymérase de phusion est à 72⁰ C. La phusion est également utilisée dans les produits de clonage pour le séquençage, l'analyse de l'expression et l'analyse de mutation.

L'ADN polymérase de phusion a l'activité d'exonucléase de 3 '- 5'. Cela permet la relecture du brin nouvellement synthétisé après la synthèse. Par conséquent, les décalages nucléotidiques sont facilement réparés. Ainsi, il a un taux d'erreur moindre. Les avantages globaux de la phusion polymérase sont;

• Fidélité extrême
• Haute vitesse et temps d'extension réduit
• Réactions robustes et nécessite une optimisation minimale
• Haut rendement

Figure 01: Phusion

Le principal inconvénient de la phusion polymérase est qu'il est inhibé en présence de désoxyuridine triphosphate (DUTP). Lorsque les Dutps sont accumulés dans le mélange réactionnel, il peut inhiber les actions de la phusion polymérase. Ceci est évité en traitant le mélange réactionnel avec la Dutpase avant d'ajouter l'enzyme. À l'heure actuelle, une variante résistante au DUTP de la phusion polymérase connue sous le nom de PFU Turbo est utilisée à la place de la phusion polymérase comme remède à ce problème.

Qu'est-ce que la polymérase Taq?

ADN polymérase TAQ L'invention a révolutionné le domaine de la biologie moléculaire. Il a résolu un problème majeur dans l'amplification de l'ADN. L'ADN polymérase Taq est une enzyme de polymérase stable à chaleur extraite et isolée de la bactérie thermophile, Thermus aquaticus. La découverte de ces enzymes conduit au développement de la PCR. Cette enzyme a permis l'utilisation de la réaction en chaîne en polymérase dans l'amplification de l'ADN au lieu de techniques de clonage laborieux conventionnelles. La PCR est désormais utilisée dans les champs de diagnostic moléculaire, agricole et industriel avec de nombreuses nouvelles variations ajoutées à la technique.

Figure 02: Taq polymérase

Taq ADN polymérase fonctionne à la plage de température optimale entre 72⁰C - 80⁰C. L'ADN polymérase TAQ nécessite un cofacteur; Magnésium pour sa fonction. La Taq polymérase n'a pas la capacité de relecture 3 '- 5', par conséquent, le taux d'erreur de l'ADN polymérase TAQ est élevé par rapport à des types plus récents d'ADN polymérases telles que la phusion polymérase, etc. Mais, la popularité de l'ADN polymérase Taq reste la même dans le monde de la science en raison de la commodité et de la flexibilité de l'enzyme.

Quelles sont les similitudes entre la phusion et la polymérase Taq?

• Les enzymes de phusion et de polymérase Taq sont des enzymes polymérisantes qui sont capables d'ajouter des nucléotides à l'extrémité libre 3 'du brin d'ADN.
• La phusion et les polymérases TAQ nécessitent une séquence d'amorce pour initier la polymérisation.
• La phusion et les polymérases Taq sont stables à la chaleur.
• La phusion et les polymérases Taq sont utilisées dans les mécanismes de PCR pour amplifier l'ADN.
• Lors de l'ajout de la polymérase au mélange réactionnel, la phusion et les polymérases Taq sont ajoutées en dernier pour assurer l'efficacité de l'enzyme.
• La phusion et les polymérases Taq sont synthétisées commercialement à des fins expérimentales de biologie moléculaire.
• La phusion et les polymérases Taq nécessitent un cofacteur pour compléter sa fonction.

Quelle est la différence entre la phusion et la polymérase Taq?

Résumé - Phusion vs Taq polymérase

Phusion et ADN polymérase Taq sont deux polymérases stables à la chaleur qui sont utilisées dans les techniques de PCR. La phusion est une polymérase isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus tandis que le Taq est isolé des bactéries thermostables Thermus aquaticus. La découverte de l'ADN polymérase TAQ conduit à l'invention de la PCR. Phusion a de nombreux avantages par rapport au Taq qui a fait de la phusion une meilleure option pour produire de l'ADN haute fidélité. Cependant, la polymérase Taq est toujours utilisée comme enzyme de polymérase standard dans PCR. C'est la différence entre la phusion et la polymérase Taq.

Référence:

1.Biolabs, Nouvelle-Angleterre. «Taq ADN polymérases.»New England Biolabs: réactifs pour l'industrie des sciences de la vie. Disponible ici  
2.«Phusion ADN polymérase.”New England Biolabs. Disponible ici 

Image gracieuseté:

1.'Gam illustré par Nivin Nasri'by Nivinn - Propre travaux, (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia  
2.'Taq'By Adénosine - Propre travaux, (CC By-Sa 3.0) via Commons Wikimedia