Différence entre la PCR et la PCR en temps réel

Le Différence clé entre la PCR et la PCR en temps réel Est-ce que la PCR conventionnelle prend plus de temps que la PCR en temps réel car il utilise l'électrophorèse sur gel pour analyser les produits de PCR amplifiés.

La réaction en chaîne de PCR ou de polymérase est une découverte révolutionnaire de la biologie moléculaire moderne, qui a d'abord été développée par le chimiste Kary Mullis en 1983. Il permet à une seule séquence dans un ADN complexe d'être amplifié pour l'analyse.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que PCR  
3. Qu'est-ce que la PCR en temps réel
4. PCR vs PCR en temps réel sous forme tabulaire
5. Résumé - PCR vs PCR en temps réel

Qu'est-ce que PCR?

L'idée de base de la PCR ou de la réaction en chaîne par polymérase est que deux amorces, qui sont complémentaires des brins opposés d'une séquence d'ADN, sont orientés les uns vers les autres; Les amorces produisent des brins complémentaires, chacun contenant l'autre amorce. Par conséquent, le résultat est une grande quantité d'une séquence correspondant à l'ADN qui se situe entre les deux amorces. L'enzyme de l'ADN polymérase est utilisée pour étendre les amorces dans PCR. L'ADN polymérase est une enzyme thermostable, et elle a la capacité de survivre à des températures élevées (94 à 95 ° C) utilisées pour la dénaturation de l'ADN de la matrice.

La PCR implique trois étapes, à savoir les cycles de dénaturation répétés, le recuit des amorces et la synthèse de l'ADN. Une machine à thermocycleur est utilisée pour effectuer cette réaction afin qu'elle puisse être programmée pour modifier les températures rapidement et avec précision. Les applications de la PCR comprennent les enquêtes criminelles, les empreintes digitales de l'ADN, la détection des agents pathogènes et l'analyse de l'ADN des premières espèces humaines.

Qu'est-ce que la PCR conventionnelle?

Il y a trois étapes majeures de PCR conventionnelle: Étape d'amplification de l'ADN, séparation de la PCR et détection des produits. La séparation des segments d'ADN est généralement effectuée par électrophorèse sur gel d'agarose. Les produits sont ensuite colorés avec du bromure d'éthidium. Enfin, la détection est obtenue par visualisation des bandes sur des gels sous la lumière UV. Par conséquent, les résultats finaux de la PCR conventionnelle ne sont pas exprimés en nombres. La PCR normalement conventionnelle est uniquement capable de détecter un seul paramètre.

Qu'est-ce que la PCR en temps réel?

La PCR en temps réel peut détecter l'amplification des produits, car les produits sont synthétisés. Avec le développement de la technologie, la PCR est devenue une technique très populaire, en particulier pour la détection et l'identification des bactéries dans les aliments. La PCR en temps réel utilise un système de colorant fluorescent et un thermocycleur équipé d'une capacité de détection fluorescente.

Quelle est la différence entre la PCR et la PCR en temps réel?

La principale différence entre la PCR et la PCR en temps réel est que la PCR conventionnelle prend plus de temps car il utilise une électrophorèse sur gel pour analyser les produits de PCR amplifiés tandis que la PCR en temps réel prend moins de temps car elle peut détecter les amplifications au cours des premières phases des phases des premières phases des phases des premières phases des phases des premières phases la réaction. La PCR en temps réel recueille des données à la phase de croissance exponentielle de la PCR tandis que la PCR traditionnelle recueille des données au point final de la réaction. De plus, les résultats du point final de la PCR conventionnelle peuvent ne pas être très précis, mais les résultats de la PCR en temps réel sont très précis. De plus, la PCR en temps réel est plus sensible que la PCR conventionnelle.

De plus, la PCR conventionnelle a une très mauvaise résolution tandis que la PCR en temps réel peut détecter très peu de changements en raison de la haute résolution. En outre, la détection du point final de la PCR conventionnelle a une courte plage dynamique tandis que la détection de PCR en temps réel a une large plage dynamique. Contrairement à la PCR conventionnelle, les techniques de détection automatisées se trouvent dans la PCR en temps réel. La PCR conventionnelle est plus sophistiquée et en main-d'œuvre que la PCR en temps réel. Contrairement à la PCR en temps réel, la PCR conventionnelle ne peut pas faire la distinction entre les bactéries mortes et vivantes. De plus, la PCR en temps réel utilise un système de colorant fluorescent pour détecter les produits tandis que la PCR conventionnelle utilise du bromure d'éthidium et de la lumière UV pour visualiser les bandes du milieu Gel Agarose.

L'infographie ci-dessous présente les différences entre la PCR et la PCR en temps réel sous forme tabulaire pour une comparaison côte à côte.

Résumé - PCR vs PCR en temps réel

La principale différence entre la PCR et la PCR en temps réel est que la PCR conventionnelle prend plus de temps que la PCR en temps réel car il utilise l'électrophorèse sur gel pour analyser les produits de PCR amplifiés. De plus, la PCR en temps réel utilise un système de colorant fluorescent pour détecter les produits tandis que la PCR conventionnelle utilise du bromure d'éthidium et de la lumière UV pour visualiser les bandes du milieu Gel Agarose.

Image gracieuseté:

1. «Polymérase Chain Reaction-en» par Enzoklop - Propre travaux (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia