Différence entre HPLC et HPTLC

Différence clé - HPLC vs HPTLC
 

La principale différence entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon alors que le HPTLC ne permet pas de séparation quantitative des composants dans un échantillon.

La chromatographie est une méthode de séparation physique utilisée pour séparer et identifier les composants dans un mélange. HPLC et HPTLC sont des techniques chromatographiques. HPLC est une chromatographie liquide haute performance. HPTLC est une chromatographie de couche mince à haute performance.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que HPLC
3. Qu'est-ce que HPTLC
4. Comparaison côte à côte - HPLC vs HPTLC sous forme tabulaire
5. Résumé

Qu'est-ce que HPLC?

HPLC est Chromatographie en phase liquide à haute performance. Il s'agit d'une technique analytique utilisée pour séparer, identifier et quantifier les composants dans un mélange. Dans cette technique, l'échantillon est dissous dans un solvant approprié. Ensuite, le solvant avec l'échantillon est passé à travers une pompe avec une pression donnée. La pompe est remplie de matériau adsorbant solide. Ensuite, certains composants se lient fortement au matériau absorbant tandis que d'autres composants se lient de manière lâche. Cela fait que les composants ont des débits différents à travers la pompe. Par conséquent, les composants peuvent être séparés facilement.

Figure 01: un système HPLC

Le matériau adsorbant qui remplit la pompe est connu sous le nom état stationnaire. Le solvant avec l'échantillon dissous est connu sous le nom de phase mobile. La pompe utilisée dans cette technique est appelée la colonne. La colonne est remplie d'un matériau adsorbant, le plus souvent, des particules de silice. La taille de ces particules peut varier de 2 à 50 μm. Le processus de séparation est affecté par la composition de la phase mobile et la température du système. Les interactions entre la phase stationnaire et le composant de l'échantillon peuvent être des interactions hydrophobes, des interactions dipol-dipole, une liaison ionique, etc.

La pression de fonctionnement du HPLC est considérablement plus élevée que celle de la chromatographie liquide traditionnelle. Il se trouve autour de 50-350 bar. La différence entre la chromatographie liquide et le HPLC est que dans la chromatographie liquide, l'échantillon tombe à travers la colonne sous gravité tandis que, dans HPLC, l'échantillon est sous pression à travers la colonne. La taille de la colonne et les particules absorbantes sont également très petites par rapport à la chromatographie liquide traditionnelle. Cependant, la résolution donnée par la technique HPLC est supérieure.

Qu'est-ce que HPTLC?

HPTLC est Chromatographie de couche mince haute performance. C'est la forme avancée et automatisée de TLC traditionnel. Cette technique offre une résolution efficace à une courte période. Dans cette méthode d'analyse, l'échantillon et une référence peuvent être analysés en même temps, ce qui permet à l'échantillon d'être comparé à la référence. Il donne une précision analytique améliorée que les autres techniques chromatographiques. Le temps pris pour l'analyse est moindre. La technique est une technique à faible coût.

Figure 02: Une analyse des colorants alimentaires utilisant HPTLC

La méthode HPTLC est un processus simple et l'étape de préparation des échantillons est également éliminée (dans TLC traditionnel, l'étape de préparation des échantillons est incluse avant la séparation. Cette étape implique le nettoyage et l'enrichissement). Le solvant peut être utilisé directement sans aucun prétraitement bien que d'autres techniques chromatographiques nécessitent des pré-traitements tels que le dégazage, la filtration, etc.

Le matériau adsorbant utilisé dans le HPTLC est de la silice avec de très petites tailles de particules. Dans TLC traditionnel, la taille des particules de la silice est de 5-20 μm alors que, dans HPTLC, il est de 4-8 μm. L'échantillon est appliqué à la plaque HPTLC à l'aide d'un applicateur. Il donne une application uniforme et sûre. Ensuite, les plaques sont placées dans une chambre ayant la phase mobile. La chambre doit être saturée de vapeur de la phase mobile. Après le processus HPTLC, les taches qui ont bougé peuvent être détectées. Lors de la détection des taches sur l'assiette, la technique HPTLC utilise une région UV appropriée ou une chambre d'iode.

Quelle est la différence entre HPLC et HPTLC?

Résumé - HPLC vs HPTLC

HPLC et HPTLC sont deux techniques chromatographiques. La principale différence entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon alors que HPTLC ne permet pas de séparation quantitative des composants dans un échantillon.

Référence:

1. "Chromatographie en phase liquide à haute performance.»Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 avril. 2018, disponible ici.
2. «HPTLC.»LinkedIn SlideShare, 30 mai 2011, disponible ici.

Image gracieuseté:

1. «Hptlcplatetoms» par Kjaergaard à l'anglais Wikipedia - transféré de EN.Wikipedia à Commons (domaine public) via Commons Wikimedia
2. «HPLC» par PD DR. relât. nat. Habil. Gertrud Morlockassociate Professeur (Privatdozentin) Université de Hohenheiminstitute of Food Chemistry - G. Morlock, C. Oellig, Camag Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia