Dans le contexte de la théorie des cellules, les cellules sont l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri des cellules est une méthodologie utilisée pour séparer les différentes cellules selon les caractéristiques physiologiques et morphologiques. Ils peuvent être de caractéristiques intracellulaires ou extracellulaires. L'interaction de l'ADN, de l'ARN et des protéines est considérée comme des propriétés interactives intracellulaires tandis que la forme, la taille et les différentes protéines de surface sont considérées comme des propriétés extracellulaires. Dans la science moderne, les méthodologies de tri des cellules ont conduit à aider les différentes recherches dans les études biologiques et également dans la création de nouveaux principes à travers la recherche sur la médecine. Le tri des cellules est réalisé sur diverses méthodologies qui incluent à la fois primitif avec moins d'équipement et méthodologies technologiques avancées avec l'utilisation de machines sophistiquées. Cytométrie en flux, Tri des cellules activées par fluorescence (FACS), la sélection des cellules magnétiques et le tri unique sont les principales méthodologies utilisées. La cytométrie en flux et les FAC sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. FACS est un type spécialisé de cytométrie en flux. La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules selon différentes molécules de surface cellulaire, taille et volume qui permet d'étudier les cellules uniques. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion et de fluorescence de la lumière en deux conteneurs ou plus. C'est le différence clé entre la cytométrie en flux et les facs.
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la cytométrie en flux
3. Qu'est-ce que FACS
4. Similitudes entre la cytométrie en flux et les FAC
5. Comparaison côte à côte - cytométrie en flux vs facs sous forme tabulaire
6. Résumé
La cytométrie en flux est une méthode qui est utilisée pour examiner et déterminer l'expression des molécules intracellulaires et la surface cellulaire et pour définir et caractériser des types de cellules distinctes. Il est également utilisé pour déterminer le volume des cellules et la taille des cellules et pour évaluer la pureté des sous-populations qui sont isolées. Cela permet l'évaluation multi-paramètres des cellules uniques à peu près au même moment. La cytométrie en flux est utilisée pour mesurer l'intensité de la fluorescence qui est produite en raison des anticorps marqués par fluorescence qui aident à identifier les protéines ou les ligands qui se lient aux cellules associées.
Figure 01: Cytométrie en flux
Généralement, la cytométrie en flux comprend trois sous-systèmes principalement. Ce sont les fluidiques, l'électronique et l'optique. Dans la cytométrie en flux, cinq composants principaux sont disponibles qui sont utilisés dans le tri des cellules. Ce sont, une cellule d'écoulement (un flux de liquide qui est utilisé pour les transporter et aligner les cellules pour le processus de détection optique), un système de mesure (peut être de systèmes différents, y compris les lampes Mercure et le xénon, refroidies par eau à haute puissance ou Lasers ou lasers à diode refroidis à faible puissance), un ADC; Système de convertisseur numérique analogique, système d'amplification et ordinateur pour analyse. L'acquisition est le processus par lequel les données sont collectées à partir des échantillons à l'aide du cytomètre en flux. Ce processus est médié par un ordinateur connecté au cytomètre en flux. Le logiciel présent dans l'ordinateur analyse les informations fournies à l'ordinateur à partir du cytomètre Flow. Le logiciel a également la capacité d'ajuster les paramètres de l'expérience contrôlant le cytomètre en flux.
Dans le contexte de la cytométrie en flux, Tri des cellules activées par la fluorescence (FACS) est une méthode qui est utilisée dans la différenciation et le tri d'un échantillon d'un mélange de cellules biologiques. Les cellules sont séparées de deux ou plusieurs conteneurs. La méthode de tri est basée sur les caractéristiques physiques de la cellule qui comprend la diffusion de la lumière et les caractéristiques de fluorescence de la cellule. Il s'agit d'une technique scientifique importante, qui peut être utilisée pour obtenir des résultats quantitatifs et qualitatifs fiables des signaux de fluorescence émis par chaque cellule. Au cours des FAC, initialement, le mélange pré-obtenu de cellules; Une suspension est dirigée vers le centre d'un flux étroit de liquide qui circule rapidement. Le flux de liquide est conçu pour séparer les cellules de la suspension en fonction du diamètre de chaque cellule. Un mécanisme de vibration est appliqué au flux de suspension qui se traduit par la formation de gouttelettes individuelles.
Figure 02: FACS
Le système est calibré afin de créer une seule gouttelet avec une cellule. Juste avant la formation de gouttelettes, la suspension d'écoulement se déplace le long d'un appareil de mesure de fluorescence qui détecte la caractéristique de fluorescence de chaque cellule. Au point de formation des gouttelettes, un anneau de charge électrique est placé sur lequel une charge est induite à l'anneau avant la mesure de l'intensité de la fluorescence. Une fois les gouttelettes formées à partir du flux de suspension, une charge est piégée dans les gouttelettes qui entre ensuite dans un système de déviation électrostatique. Selon la charge, le système détourne les gouttelettes dans différents conteneurs. La méthode d'application de la charge varie selon les différents systèmes utilisés dans FACS. L'équipement utilisé dans FACS est connu sous le nom de trieur de cellules activées par fluorescence.
Cytométrie en flux vs facs | |
La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules selon différentes molécules de surface cellulaire, taille et volume qui permet d'étudier les cellules uniques. | FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion et de fluorescence de la lumière en deux conteneurs ou plus. |
La cellule est l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri des cellules est le processus par lequel les cellules sont isolées et différenciées en différentes catégories en fonction de leurs propriétés intracellulaires et extracellulaires. La cytométrie en flux et les FAC sont deux méthodologies importantes dans le tri des cellules. Les deux processus sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules selon différentes molécules de surface cellulaire, taille et volume qui permet d'étudier les cellules uniques. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion et de fluorescence de la lumière en deux conteneurs ou plus. C'est la différence entre la cytométrie en flux et les FAC.
Vous pouvez télécharger la version PDF de cet article et l'utiliser à des fins hors ligne selon la note de citation. Veuillez télécharger la version PDF ici différence entre la cytométrie en flux et les FAC