Différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions
Le différence clé entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions est que Nous pouvons utiliser la chromatographie d'affinité pour séparer les composants chargés ou non chargés dans un mélange alors que nous pouvons utiliser la chromatographie d'échange d'ions pour séparer les composants chargés dans un mélange.
La chromatographie est une technique que nous pouvons utiliser pour séparer les composants souhaités dans un mélange. Il existe différents types tels que la chromatographie liquide, la chromatographie en phase gazeuse, etc. La chromatographie d'affinité et la chromatographie d'échange d'ions sont deux sous-catégories de chromatographie liquide. De plus, dans ces techniques, il y a deux phases. À savoir, ils sont la phase stationnaire et la phase mobile. Le but de ces techniques est de séparer les composants, en fonction de la liaison des composants, en phase mobile à la surface de la phase stationnaire.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la chromatographie d'affinité
3. Qu'est-ce que la chromatographie d'échange d'ions
4. Comparaison côte à côte - Chromatographie sur l'échange d'ions sur forme tabulaire
5. Résumé
Qu'est-ce que la chromatographie d'affinité?
La chromatographie d'affinité est une technique biochimique que nous utilisons pour séparer les composants dans un mélange en fonction des interactions entre ces composants.
Les interactions que nous utilisons dans ce cas incluent les suivants:
- Interactions antigène-anticorps
- Interactions enzymatiques-substrat
- Interactions récepteurs-ligands
- Interactions protéine-nucléique
Dans cette technique, nous utilisons les propriétés moléculaires des molécules pour cette technique de séparation. Ici, nous permettons au composé souhaité interagir avec une phase stationnaire via une liaison hydrogène, une interaction ionique, des ponts disulfure, une interaction hydrophobe, etc. Les molécules qui n'interagissent pas avec la phase stationnaire s'élueront en premier. Ainsi, nous pouvons le séparer du mélange. Le composé souhaité restera attaché à la phase stationnaire. Par conséquent, nous pouvons le détacher à l'aide d'un solvant éluant et le faire éluer pour le séparer également.
Figure 01: une colonne chromatographique
La chromatographie d'affinité est utile pour la purification et la concentration d'une substance d'un mélange à l'aide d'une solution tampon. Il est également utile pour réduire les substances indésirables dans un mélange. Lorsque nous considérons l'appareil que nous utilisons pour ce processus, nous devons utiliser une colonne remplie de notre phase stationnaire. Ensuite, nous devons charger la phase mobile qui contient les biomolécules que nous allons séparer. Ensuite, permettez-leur de se lier avec la phase stationnaire. Par la suite, à l'aide d'un tampon de lavage, nous pouvons séparer les biomolécules non cibles, mais les molécules cibles devraient avoir une affinité élevée pour la phase stationnaire afin de réussir le processus de séparation.
Qu'est-ce que la chromatographie d'échange d'ions?
La chromatographie ionique est une forme de chromatographie liquide dans laquelle nous pouvons analyser les substances ioniques. Souvent, nous l'utilisons pour analyser les anions et les cations inorganiques (I.e. chlorure et nitrate anions et potassium, cations sodium). Bien qu'il soit moins courant, nous pouvons également analyser les ions organiques. De plus, nous pouvons utiliser cette technique pour la purification des protéines car les protéines sont des molécules chargées à certaines valeurs de pH. Ici, nous utilisons une phase stationnaire solide à laquelle les particules chargées peuvent se fixer. Par exemple, nous pouvons utiliser les copolymères en polystyrène-divinylbenzène en résine comme support solide.
Figure 02: Phases de la chromatographie d'échange d'ions
Pour expliquer cela davantage, la phase stationnaire a des ions fixes tels que des anions sulfates ou des cations amine quaternaires. Chacun de cela devrait s'associer à une contre-ion (un ion à charge opposée), si nous voulons maintenir la neutralité de ce système. Ici, si le contre-ion est un cation, alors nous nommons le système comme une résine d'échange de cations. Mais, si le contre-ion est un anion, le système est une résine d'échange d'anions.
Il existe cinq phases principales dans un processus d'échange d'ions;
- Stade initial
- Adsorption de la cible
- Début de l'élution
- Fin d'élution
- Régénération
Quelle est la différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions?
La chromatographie d'affinité est une technique biochimique que nous utilisons pour séparer les composants dans un mélange en fonction des interactions entre ces composants tandis que la chromatographie ionique est une forme de chromatographie liquide dans laquelle nous pouvons analyser les substances ioniques. Par conséquent, la principale différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions est que nous ne pouvons utiliser la chromatographie d'échange d'ions uniquement pour la séparation des substances ioniques tandis que la chromatographie d'affinité est capable de séparer les particules chargées et non chargées. Lorsque vous envisagez le principe de travail, la différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions est que la chromatographie sur l'affinité se déroule en raison du fait que les molécules cibles ont une affinité élevée pour la phase stationnaire. Cependant, pour la chromatographie d'échange d'ions, les molécules cibles ont une charge opposée à celle de la surface de phase stationnaire.
L'infographie ci-dessous présente la différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions comme comparaison côte à côte.
Résumé - Chromatographie sur les échanges d'ions vs ion
En résumé, l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions sont deux formes de techniques chromatographiques liquides. La principale différence entre l'affinité et la chromatographie d'échange d'ions est que nous pouvons utiliser la chromatographie d'affinité pour séparer les composants chargés ou non chargés dans un mélange tandis que nous pouvons utiliser la chromatographie d'échange d'ions pour séparer les composants chargés dans un mélange.
Référence:
1. "Chromatographie d'affinité.»Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 octobre. 2018. Disponible ici
2. LibreTexts. «Chromatographie d'échange d'ions.”Chemistry LibreTexts, LibreTexts, 29 décembre. 2016. Disponible ici
Image gracieuseté:
1.«Nickel Resin» par Pdcook - Propre travaux, (CC By-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.«IEX» par Daliak (domaine public) via les communes Wikimedia
