Quelle est la différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides

Le différence clé Entre la levure un hybride et la levure deux hybrides Est-ce que la levure un hybride est un in vitro test basé pour analyser les interactions ADN-protéine tandis que la levure deux hybrides est un in vitro Dosage basé pour analyser les interactions protéine-protéine.

L'étude des interactions entre les molécules cellulaires peut aider à définir les sites de reconnaissance impliqués dans l'expression des gènes et les voies protéiques. Les interactions de l'ADN et des protéines font partie intégrante des processus cellulaires tels que les modifications de l'ADN et la régulation transcriptionnelle, etc. D'un autre côté, les interactions protéiques et protéines jouent un rôle vital dans des processus cellulaires tels que la réplication, la transcription, la traduction et la transduction du signal. Par conséquent, il est extrêmement important d'identifier ces interactions des molécules cellulaires à travers différents tests. Levure un hybride et la levure deux hybrides sont deux in vitro tests basés pour analyser les interactions ADN-protéine et protéine-protéine.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que la levure un hybride
3. Qu'est-ce que la levure deux hybrides
4. Similitudes - levure un hybride et levure deux hybrides
5. Levure un hybride vs levure deux hybrides sous forme tabulaire
6. Résumé - Levure un hybride vs levure deux hybrides

Qu'est-ce que la levure un hybride?

Levure un hybride (y1h) est un in vitro Dosage basé pour analyser les interactions intracellulaires d'ADN-protéine. Cette méthode a été établie pour la première fois par Wang et Reed en 1993. Depuis lors, il a montré un plus grand pouvoir de la recherche biologique. Dans ce test, il y a deux composants principaux: l'appât d'ADN et les proies protéiques.

Figure 01: levure un hybride

Dans la procédure, une séquence d'ADN (appât d'ADN) est d'abord clonée en amont de deux journalistes différents (His3, Lacz). Ces constructions reporter sont intégrées dans le génome d'une souche de levure. Les facteurs de transcription sont pris comme des proies protéiques. Les facteurs transcriptionnels sont fusionnés au domaine d'activation transcriptionnel (AD) du facteur transcriptionnel de la levure GAL4 afin de fabriquer des protéines hybrides. Toute cette protéine hybride est intégrée dans un plasmide avant de l'introduire dans la souche de levure. Après l'introduction du plasmide recombinant, lorsque le facteur transcriptionnel interagit avec le fragment d'ADN, la fraction AD active l'expression du gène du rapporteur (His3or Lacz). Le séquençage des plasmides permet d'identifier le facteur transcriptionnel qui peut se lier au fragment d'ADN. Récemment, la méthode hybride de levure une a été utilisée pour rechercher le diagnostic des maladies. Par conséquent, à l'avenir, ce test sera plus largement utilisé dans la recherche scientifique et les traitements médicaux.

Qu'est-ce que la levure deux hybrides?

Levure deux hybrides (y2h) est un in vitro Dosage basé pour analyser les interactions intracellulaires des protéines et des protéines. Cette méthode a été initialement trouvée par Stanley Fields et Ok-Kyu Song en 1989. Cette technique détecte les interactions protéine-protéine en utilisant le facteur de transcription GAL4 de la levure.

Figure 02: levure deux hybrides

Dans cette méthode, deux fusions (hybrides) sont d'abord construites en utilisant des protéines d'intérêt: fusion d'une protéine avec un domaine de liaison à l'ADN (DBD) et en fusionnant l'autre protéine avec le domaine activateur (AD) du facteur de transcription GAL4. La protéine fusionnée avec DBD est connue sous le nom d'appât tandis que la protéine fusionnée avec la MA est connue sous le nom de proie. Dans la souche de levure, sur l'interaction de l'appât et des proies, la DBD et la MA sont rapprochées pour générer un facteur de transcription GAL4 fonctionnel en amont du gène rapporteur. Le facteur de transcription fonctionnelle active l'expression du gène du rapporteur. De plus, cette méthode est actuellement utilisée pour filtrer les interactions des protéines membranaires intégrales dans les cellules de mammifères.

Quelles sont les similitudes entre la levure un hybride et la levure deux hybrides?

• Levure un hybride et la levure deux hybrides sont deux in vitro tests basés pour analyser les interactions ADN-protéine et protéine-protéine.
• Ces tests utilisent des souches de levure.
• Les deux tests utilisent le domaine d'activation (AD) du facteur de transcription GAL4.
• Ils utilisent l'expression du Gene Reporter (His3 ou Lacz) pour détecter les interactions.
• Ils ont des appâts et des proies.
• Les deux tests sont très utiles dans la recherche biologique moderne.

Quelle est la différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides?

Levure un hybride est un in vitro test basé pour analyser les interactions de l'ADN et des protéines tandis que la levure deux hybrides est un in vitro Dosage basé pour analyser les interactions protéiques et protéines. Ainsi, c'est la principale différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides. De plus, dans la levure un hybride, l'appât est un fragment d'ADN et la proie est une molécule protéique. D'un autre côté, dans la levure deux hybrides, les appâts et les proies sont des molécules de protéines.

L'infographie ci-dessous répertorie les différences entre la levure un hybride et la levure deux hybrides sous forme tabulaire pour une comparaison côte à côte.

Résumé - Levure un hybride vs levure deux hybrides

Levure un hybride et la levure deux hybrides sont deux importants in vitro tests basés. Levure un hybride est un in vitro test basé pour analyser les interactions de l'ADN et des protéines tandis que la levure deux hybrides est un in vitro Dosage basé pour analyser les interactions protéiques et protéines. Ainsi, c'est la principale différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides.

Référence:

1. Reece-Hoyes, John S et Albertha J M Walhout. «Des tests de levure centrée sur le gène.»Méthodes en biologie moléculaire (Clifton, N.J.), U.S. Bibliothèque nationale de médecine, 2012.
2. Shaffer, Dr. Catherine. «Applications de dépistage de la levure à deux hybrides.”News, 26 février. 2019.

Image gracieuseté:

1. «Figure 17 05 01» par CNX OpenStax - (CC par 4.0) via Commons Wikimedia
2. «Deux tests hybrides» par Anna - Propre travaux (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia