Différence entre le vecteur de phage YAC et M13
Différence clé - vecteur de phage YAC vs M13
Le clonage de l'ADN est un processus important qui permet la propagation d'importants fragments d'ADN des organismes. Il nécessite une adhésion à l'ADN spécifique avec l'ADN vectoriel pour créer de l'ADN recombinant qui se transforme en organisme hôte. Un vecteur est une molécule d'ADN qui se comporte comme un véhicule pour transporter du matériel génétique étranger dans une autre cellule ou organisme. Il devrait être capable de se répliquer à l'intérieur de l'organisme hôte et de produire plusieurs copies de l'ADN recombinant. Il existe différents types de vecteurs utilisés dans le clonage d'ADN. Le chromosome artificiel de levure (YAC) et le vecteur de phage M13 sont deux types parmi eux. La principale différence entre le vecteur de phage YAC et M13 est que YAC est un chromosome artificiel qui se réplique dans les cellules de levure alors que Le vecteur de phage M13 est un ADN circulaire simple brin de bactériophage M13 qui se réplique dans E coli cellules.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que Yac
3. Qu'est-ce que le vecteur de phage M13
4. Comparaison côte à côte - vecteur de phage YAC vs M13
5. Résumé
Qu'est-ce qu'un vecteur yac?
YAC est un chromosome artificiellement construit qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de reproduire dans les cellules de levure. Il a des séquences centromères, télomères et reproduisant autonome les séquences essentielles à la réplication et à la stabilité. YAC doit également supporter un marqueur ou des marqueurs sélectifs et des sites de restriction pour en faire un vecteur de clonage efficace. De grandes séquences allant de 1000 kb à 2000 kb peuvent être insérées dans du YAC et transférées dans la levure.
Figure 01: vecteur YAC
Qu'est-ce que le vecteur de phage M13?
Le bactériophage M13 est un virus qui infecte et réplique E coli. Le génome du bactériophage M13 est de petite taille, environ 6.7 kb. C'est un ADN sensoriel circulaire et positif à brin. Ce virus infecte spécifiquement E coli bactéries à travers f pilus. Une fois qu'il entre dans l'ADNsb dans la bactérie, il synthétise son brin complémentaire et devient l'ADNdb ou la forme réplicative (RF) de M13. RF peut se comporter comme un plasmide dans l'organisme hôte. L'ADNsb se réplique à l'intérieur E coli et produit l'ADNsb portant de nouveaux phages. Ces nouveaux phages sont libérés en continu du E coli sans tuer la cellule hôte. Cependant, l'infection ralentit la croissance de E coli. l'ADNdb peut être extrait des cellules bactériennes et utilisé comme vecteurs dans le clonage d'ADN. Ils sont connus sous le nom de vecteurs de phage M13. Ils peuvent être facilement manipulés et utilisés de la même manière pour les vecteurs plasmidiques.
La capacité inhérente à l'infection de ces phages M13 sert de bonne qualification à utiliser comme vecteur dans le clonage des gènes. Lors du développement de M13 en un vecteur, plusieurs éléments doivent être incorporés dans son génome. Ce sont, un gène pour la protéine répresseur de Lac (lac I), la région opératrice-proximale de la Lac Z Gene, un promoteur lac et un site de clonage multiple (Polylinker). Lorsque l'ADNA du M13 est utilisé comme vecteurs, il peut être traité comme un vecteur plasmidique. Cependant, l'utilisation de l'ADNc M13 présente des avantages dans le séquençage de l'ADN et la mutagenèse dirigée.
Puisque le vecteur de phage M13 porte un site de clonage multiple dans lacz région, les vecteurs recombinés peuvent être facilement identifiés par le dépistage de la colonie bleue / blanc sur des plaques d'agar contenant IPTG et X-Gal. Les plaques bleues produites sur les plaques ne contiennent pas les phages recombinés. Par conséquent, les phages avec des inserts peuvent être sélectionnés à des fins de clonage.
Figure 02: Bactériophage M13
Quelle est la différence entre le vecteur de phage YAC et M13?
Vecteur de phage YAC vs M13 | |
| YAC est un chromosome génétiquement modifié qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. | Le vecteur de phage M13 est un vecteur viral développé par le bactériophage M13 qui est utilisé pour insérer l'ADN étranger dans E coli. |
| But | |
| Les YAC ont été conçus pour cloner de grands fragments d'ADN génomique dans la levure. | Les vecteurs de phage M13 sont utilisés pour insérer l'ADN étranger dans E coli. |
| Longueur d'insertion | |
| Les YAC peuvent contenir des inserts génomiques de la taille d'une mégabase (1000 Ko - 2000 Ko). | La taille des inserts est d'environ 1 500 bps. |
| Construction | |
| L'ADN YAC est difficile à purifier intact et nécessite une concentration élevée pour générer un système vectoriel YAC. | Il se produit via une chaîne d'électrons photosynthétiques cycliques. |
| La stabilité | |
| YAC est instable. | Les phages M13 peuvent être facilement extraits. |
| Taille | |
| Les enzymes sont des molécules plus grandes. | Les phages M13 sont stables que YAC. |
Résumé - vecteur de phage YAC vs M13
YAC est un système vectoriel artificiellement construit en utilisant une région spécifique de chromosome de levure pour insérer de grands segments de matériel génétique aux cellules de levure. Le vecteur de phage M13 est un système vectoriel dérivé du bactériophage M 13 qui utilise E coli En tant qu'organisme hôte. C'est la principale différence entre le vecteur de phage YAC et M13. Les deux sont tout aussi utiles dans la technologie d'ADN recombinant et le clonage des gènes.
Référence:
1."Vecteur.”Génétique notes - Vector. N.p., n.d. la toile. 16 mai 2017. https: // génétique-notes.wikispaces.com / vecteur
2.«Chromosome artificiel de levure." Wikipédia. Fondation Wikimedia, 21 avril. 2017. la toile. 16 mai 2017. .
Image gracieuseté:
1. «M13B» par J3D3 - Propre travaux (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
