Différence entre GFP et EGFP

Le différence clé entre GFP et EGFP est que le GFP est Une protéine de type sauvage incorporé dans le clonage moléculaire des cellules non mammifères tandis que l'EGFP est un type amélioré ou d'ingénierie de GFP qui peut être utilisé sur les cellules de mammifères.

Le clonage moléculaire est une technique avancée que les scientifiques utilisent énormément pour exprimer des protéines via la technologie recombinante. Dans la technologie d'ADN recombinant, il est nécessaire de transformer avec succès le vecteur recombinant pour héberger l'organisme.  Par conséquent, pendant le processus de transformation, il doit être identifié et confirmé si le gène d'intérêt a été transformé ou non à l'hôte. Pour évaluer cela, les biologistes moléculaires adoptent plusieurs techniques. Parmi ces techniques, l'une est un journaliste. Ces gènes reporter agissent comme des marqueurs sélectionnables pour sélectionner les transformants corrects. Ainsi, la protéine fluorescente verte (GFP) et la protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) sont deux protéines reporter utilisées dans le clonage moléculaire.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que GFP
3. Qu'est-ce que l'EGFP
4. Similitudes entre GFP et EGFP
5. Comparaison côte à côte - GFP vs EGFP sous forme tabulaire
6. Résumé

Qu'est-ce que GFP?

La GFP est une protéine de type sauvage qui contient 238 résidus d'acides aminés et plusieurs régions sélectionnables de séquences d'acides aminés qui la distinguent des autres protéines fluorescentes. De plus, cette protéine de type sauvage était à l'origine isolée de Aequorea victoria; Un type de méduse. Cependant, dans les phénomènes naturels, les méduses ont pu produire une fluorescence de couleur verte en réponse à certains stimuli.

Plus tôt, ce concept a surpris les scientifiques, et ils ont décidé de l'utiliser sur leurs technologies d'ADN recombinantes. Par conséquent, les scientifiques ont utilisé cette forme mutante du gène de type sauvage comme gène reporter dans leurs études d'expression génique. Le gène de type sauvage de GFP est capable de produire une protéine qui donne une fluorescence à température ambiante ou sous la lumière UV. Par conséquent, lorsqu'il est inséré dans les transformants, il exprime et produit une fluorescence. Si la fluorescence résulte après le processus de transformation, il confirme le succès du processus de transformation. En termes simples, l'émission de fluorescence signale la transformation réussie du vecteur qui porte le gène d'intérêt dans l'hôte.

Figure 01: GFP

Pour cette raison, la GFP agit comme un in vivo marqueur de l'expression des gènes. À l'heure actuelle, les techniques de génie génétique sont utilisées pour produire GFP. De plus, de nombreuses versions améliorées de GFP telles que l'EGFP sont disponibles. Par conséquent, cela permet une utilisation efficace de la GFP dans les études de clonage moléculaire et d'expression génique.

Qu'est-ce que l'EGFP?

La protéine fluorescente verte améliorée ou l'EGFP est une version améliorée de GFP. En termes simples, nous pouvons définir l'EGFP comme une version d'ingénierie de GFP de type sauvage. Lorsque le gène de type sauvage de GFP mute, il produit des effets bénéfiques. Par conséquent, le gène muté de GFP permet l'expression de nouveaux caractères, et en conséquence, nous pouvons produire une GFP améliorée avec des caractéristiques améliorées. De plus, nous pouvons introduire des mutations avec succès dans le gène GFP de type sauvage en utilisant l'irradiation ou les méthodes chimiques. Ces gènes mutés produisent ensuite l'EGFP, qui a des caractéristiques plus bénéfiques.

Figure 02: EGFP

Les caractéristiques améliorées de l'EGFP sont les suivantes;

• Capable d'émettre des signaux de fluorescence plus forts.
• A une sensibilité élevée.
• Peut l'utiliser sur des cellules de mammifères au lieu de procaryotes et d'autres eucaryotes de niveau inférieur.
• Aussi, fournit une pureté accrue du produit.

Par conséquent, par rapport à la GFP, l'EGFP est le choix préféré pour les études d'expression génique. Cependant, le produit est plus cher par rapport à GFP.

Quelles sont les similitudes entre GFP et EGFP?

• GFP et EGFP sont deux protéines qui ont la capacité d'émettre de la couleur verte
• Par conséquent, les deux fonctionnent comme des protéines rapporteuses dans les études d'expression génique.
• De plus, il est possible de synthétiser les deux en utilisant la technologie d'ADN recombinant.
• De plus, il est facile de muter davantage ces deux types pour synthétiser des formes améliorées.

Quelle est la différence entre GFP et EGFP?

Le Gene Reporter est un gène qui s'attache au gène d'intérêt pour la technologie ADN recombinante. Il signale la transformation réussie du vecteur recombinant en hôte. Ici, la GFP et l'EGFP sont deux types de protéines florales vertes qui fonctionnent comme des protéines rapporteuses. Cependant, la principale différence entre GFP et EGFP est que la GFP est un type sauvage tandis que l'EGFP est une version d'ingénierie de GFP. De plus, l'EGFP a des caractéristiques plus bénéfiques que GFP. Par exemple, l'EGFP produit une lumière fluorescente plus forte et est plus sensible que la GFP. Une autre différence entre GFP et EGFP est les systèmes dans lesquels nous pouvons les utiliser. Les systèmes non mammifères utilisent la GFP tandis que les systèmes de mammifères utilisent l'EGFP.

L'infographie ci-dessous présente la différence entre GFP et EGFP sous forme tabulaire.

Résumé - GFP vs EGFP

La GFP et l'EGFP sont des protéines reporter dans les études de clonage moléculaire et d'expression génique. GFP est la protéine de type sauvage, qui est une protéine fluorescente verte. La protéine était initialement isolée des méduses Aequorea victoria. En revanche, l'EFGP est une forme améliorée de protéine GFP. C'est un mutant du type sauvage avec des caractéristiques améliorées. Par conséquent, l'EFGP a la résistance du signal plus élevée et une sensibilité plus élevée. Par conséquent, nous pouvons l'utiliser sur des vecteurs de mammifères. En revanche, l'utilisation de la GFP n'est principalement que sur des vecteurs non mammifères. Dans l'ensemble, c'est la différence entre GFP et EGFP.

Référence:

1.Cinelli, R A, et al. «La protéine fluorescente verte améliorée comme outil pour l'analyse de la dynamique et de la localisation des protéines: étude de fluorescence locale au niveau unique de molécule.”Photochimie et photobiologie., U.S. Bibliothèque nationale de médecine, juin 2000. Disponible ici  
2.«PDB101: molécule du mois: protéine fluorescente verte (GFP).”RCSB: PDB-101. Disponible ici

Image gracieuseté:

1.«Film de protéine fluorescent GFP» par Erin Rod - Propre travaux, (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia 
2.«Ca2 Amigo2 Egfp Mouse» par Dudek, Serena; Curuana, Douglas; Carstens, Kelly - Propre travaux, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia