Le différence clé entre ELISA compétitif et non compétitif ELISA compétitif utilise un antigène d'inhibition tandis que ELISA non compétitif n'utilise pas d'antigène d'inhibition pour le test.
Le test immuno-enzymatique (ELISA) est un test immunologique qui détecte diverses cibles telles que les anticorps, les antigènes, les protéines et les glycoprotéines. C'est une méthode rapide et simple à effectuer. Par conséquent, il est plus souvent utilisé à des fins de recherche et de diagnostic. ELISA implique l'utilisation d'enzymes et la liaison spécifique de l'anticorps et de l'antigène. Sur la base de la façon dont les réactions se produisent, il existe quatre types d'ELISA: ELISA directe, ELISA indirecte, ELISA sandwich et inhibition ELISA. ELISA directe, indirecte et sandwich est des types d'ELISA non compétitifs tandis que l'inhibition ELISA est un type d'ELISA complète. L'objectif principal de cet article est de discuter de la différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que ELISA compétitif
3. Qu'est-ce que ELISA non compétitif
4. Similitudes entre ELISA compétitif et non compétitif
5. Comparaison côte à côte - ELISA compétitif vs non compétitif sous forme tabulaire
6. Résumé
ELISA compétitif mesure la concentration d'antigène dans un échantillon par la détection de l'interférence du signal. Ici, le test utilise un antigène inhibiteur. Par conséquent, c'est un type d'inhibition ELISA. Au cours de cette procédure, les antigènes présents dans l'échantillon rivalisent avec l'antigène de référence sélectionné pour se lier à une quantité spécifique d'anticorps marqué. En outre, cette procédure déclenche avec l'incubation de l'échantillon, avec la quantité excessive d'anticorps marqués. De plus, l'antigène de référence doit être précoé sur une plaque de dosage de puits multiples. Ensuite, le mélange d'échantillon doit être ajouté à la plaque de dosage qui contient l'antigène de référence. Les anticorps libres se lieront à l'antigène de référence en fonction de la quantité d'antigène dans l'échantillon. Par conséquent, si plus d'antigène échantillon est présent, moins d'antigène de référence sera détecté. Ainsi, cela crée un signal plus faible.
Figure 01: Elisa
En revanche, lorsque l'échantillon contient moins d'antigène, de plus en plus d'antigène de référence occupera les anticorps et donnera un signal fort. Étant donné que ELISA compétitif donne un signal plus fort lorsque l'échantillon contient une faible quantité d'antigènes, ELISA compétitif est un test très sensible, même pour les échantillons avec un petit nombre d'antigènes.
Dans certains kits ELISA compétitifs, un antigène marqué est utilisé à la place d'un anticorps marqué. Ici, l'antigène marqué et l'antigène de l'échantillon se concurrenceront pour se lier à l'anticorps primaire. De même, lorsque la quantité d'antigène dans l'échantillon est faible, la quantité d'antigène marqué qui se lie aux anticorps sera plus élevée et créera un signal plus fort.
Parmi les quatre types d'ELISA, trois types sont ELISA non compétitives. Ils sont directs ELISA, ELISA indirecte et Sandwich Elisa. Les trois formats fonctionnent sous le principe commun d'Elisa avec de légères différences dans leurs méthodologies.
ELISA direct utilise un anticorps primaire marqué enzyme. Par conséquent, il ne nécessite pas d'anticorps secondaire. Par conséquent, ELISA direct est plus rapide que les autres types d'Elisa. L'anticorps primaire se liera directement à l'antigène cible immobilisé qui est présent dans la plaque. Par conséquent, la réaction enzymatique-substrat aura lieu, produisant un signal visible.
Figure 02: Sandwich Elisa
Contrairement à ELISA direct, ELISA indirecte utilise un anticorps primaire non marqué et un anticorps secondaire marqué enzymatique. Une fois que l'anticorps primaire se lie à l'antigène immobilisé, l'anticorps secondaire se lie à l'anticorps primaire. L'enzyme de l'anticorps secondaire réagira avec l'antigène et produira un signal visible. Sandwich Elisa est différent d'Elisa directe et indirecte. Ici, l'anticorps est immobilisé à la paroi de la plaque de test.
ELISA compétitif est un type d'ELISA qui repose sur l'achèvement entre l'antigène analyte et l'antigène marqué pour une quantité limitée d'anticorps spécifiques. D'un autre côté, il n'existe pas de concours de ce type entre l'antigène d'intérêt et l'antigène de référence dans ELISA non compétitif. Ainsi, c'est la principale différence entre ELISA compétitive et non compétitive. De même, ELISA compétitif est une inhibition ELISA tandis que ELISA non compétitif n'est pas une inhibition ELISA. Donc, c'est aussi une différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
De plus, ELISA compétitif est plus adaptée pour mesurer une faible quantité d'antigène d'intérêt. C'est une méthode sensible. D'un autre côté, ELISA non compétitif ne dépend pas du nombre d'antigènes présents dans un échantillon. Par conséquent, c'est aussi une différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
L'infographie ci-dessous explique la différence entre ELISA compétitive et non compétitive.
Les ELISA compétitives et non compétitives sont les deux principaux types de tests immunosorbants liés à ELISA ou enzymes. En résumant la différence entre ELISA compétitive et non compétitive, l'ELISA compétitive repose sur la concurrence entre l'antigène d'intérêt et l'antigène de référence à la quantité limitée d'anticorps. Par conséquent, ELISA compétitif est également nommée ELISA inhibition. D'un autre côté, ELISA non compétitif ne s'appuie pas sur la concurrence entre les antigènes cibles et les antigènes de référence. Il utilise un excès d'anticorps spécifique étiqueté vers l'analyte d'intérêt. Ainsi, c'est la principale différence entre ELISA compétitive et non compétitive. ELISA direct, ELISA indirecte et Sandwich ELISA sont les trois principaux types d'Elisa non compétitives.
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«Elisa Tipus» par Carolfv333 - Propre travaux (CC By-SA 4.0) Commons Wikimedia.
«Sandwich Immunoassay, Elisa» de Nickct - Propre travaux (CC By-SA 3.0) via Commons Wikimedia